[發(fā)明專利]一種[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910094531.4
• 申請日: 2019-01-27
• 公開（公告）號: CN109912690A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發(fā)明（設計）人: 劉兵;張道桂;王林鵬;單連民;張嫣;萬龍巖
• 申請（專利權(quán)）人: 上海麗珠制藥有限公司
• 主分類號: C07K7/23
• 分類號: C07K7/23;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/36;C07K1/14
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一種[6?L?亮氨酸]?醋酸亮丙瑞林的制備方法：(1)固相接肽：通過準備原料、接二肽、接三肽、接四肽、接五肽、接六肽、接七肽、接八肽和接九肽的步驟，得到亮丙瑞林九肽樹脂，其中，接二肽到接九肽的步驟均包括去保護基；(2)胺解：通過乙基胺從上述亮丙瑞林九肽樹脂上解離粗品；(3)HPLC純化：經(jīng)HPLC制備柱純化得到醋酸亮丙瑞林中間純化品；(4)濃縮；(5)過濾、凍干。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種化學合成方法，具體涉及制備[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林的制備方法。

背景技術(shù)

目前醋酸亮丙瑞林原料藥生產(chǎn)采用制備Boc-Pro--固相接肽-胺解-HPLC純化-濃縮-過濾凍干工藝或采用制備FMoc-Pro--固相接肽-酸切割-乙胺化修飾-側(cè)鏈全保護切割-HPLC純化-濃縮-過濾凍干工藝。其中，固相接肽為通過準備原料、接二肽、接三肽、接四肽、接五肽、接六肽、接七肽、接八肽和接九肽的步驟，得到亮丙瑞林九肽樹脂。

在固相接肽過程中，由于發(fā)生消旋化等副反應，會產(chǎn)生多種副產(chǎn)物，雖然經(jīng)過純化去除副產(chǎn)物，但是依然會有部分殘留在最終的成品原料藥內(nèi)。歐盟藥典(日本和美國藥典也均有描述)可知殘留在原料藥內(nèi)已知的有關(guān)物質(zhì)主要包括以下11種：[3-D-色氨酸]-醋酸亮丙瑞林、 [2-D-組氨酸，4-D-絲氨酸]-醋酸亮丙瑞林、[7-D-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林、[4-D-絲氨酸]-醋酸亮丙瑞林、[2-D-組氨酸]-醋酸亮丙瑞林、(5-oxo-D-Proline)]-醋酸亮丙瑞林、 [8-[5-N-[imino(1H-pyrazol-1y1)-L-ornithine]]-醋酸亮丙瑞林、[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林、[5-D- 酪氨酸]-醋酸亮丙瑞林、[4-dehydroalanine]-醋酸亮丙瑞林、[4-(O-acetyl-L-絲氨酸)]-醋酸亮丙瑞林。其中，[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林結(jié)構(gòu)式如下：

pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Leu-Leu-Arg-Pro·NHC₂H₅。

上述每個有關(guān)物質(zhì)除了在成品內(nèi)的含量必須得到嚴格控制外，其理化性質(zhì)、是否對患者產(chǎn)生不良反應以及毒理作用等，也要求盡可能清楚。要想對上述每個有關(guān)物質(zhì)進行深入研究，必須得到足夠量、結(jié)構(gòu)正確且高純度的有關(guān)物質(zhì)就顯得尤為重要。

目前得到上述有關(guān)物質(zhì)的途徑主要為在對醋酸亮丙瑞林粗品進行純化時，對微量的有關(guān)物質(zhì)進行收集，此法所得有關(guān)物質(zhì)量少且純度較低。或者是收集到一定量后，再對其進行純化得到，此法所得有關(guān)物質(zhì)純度較高，但是需要富集多批次的粗品才能得到一定量的有關(guān)物質(zhì)，周期長，成本高。上述通過純化目標肽，得到有關(guān)物質(zhì)的方法受粗品純度和純化的分離度影響較大，當粗品內(nèi)有關(guān)物質(zhì)較少和純化分離度較低時(例如：相對出峰時間為0.7至0.78 的4種有關(guān)物質(zhì)，純化時被一起去除，相對出峰時間為0.9至1.09的3種有關(guān)物質(zhì)與目標峰相似，難以分離)，難以得到結(jié)構(gòu)明確的所需的有關(guān)物質(zhì)。

目前尚未有合成[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本專利根據(jù)歐盟藥典(日本和美國藥典也均有描述)對相對出峰時間為1.2，英文字母為 C，【[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林】有關(guān)物質(zhì)，提供另一種方法，即用合成法直接合成出粗品，然后再通過HPLC純化-濃縮-過濾-真空冷凍干燥得到高純度的目標產(chǎn)物。

本專利提供了[6-L-亮氨酸]-醋酸亮丙瑞林】有關(guān)物質(zhì)的合成方法。本方法為Boc法固相合成方法，通過對反應溫度，不同氨基酸使用不同的活化劑、脫BOC保護基試劑的應用， BOC-Pro-樹脂中BOC-Pro的取代度的不斷改進，不僅克服了Fmoc法生產(chǎn)周期長，成本高的缺點，本發(fā)明最大的優(yōu)點是使副反應最小化，明顯提高了BOC法粗品合成產(chǎn)率達到60％以上，同時大大提高了粗品質(zhì)量，降低了生產(chǎn)成本。

本專利的制備方法，具體為：氨基酸均為L氨基酸