[發明專利]與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 201910094416.7
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN109593878A
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發明（設計）人: 樂軍
• 申請（專利權）人: 綠亨科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 王珂

1.一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記，其特征在于：所述的分子標記P-05-112的引物序列為：

P-05-112F：5’- ACTGGGGAACACTTACGGC-3’；

P-05-112R：5’- TCTCAGCAAGGGATTAAAGGC-3’。

2.一種權利要求1所述的與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記的應用，其特征在于：所述分子標記應用于辣椒細胞核雄性不育品系的輔助選擇育種。

3.如權利要求2所述的分子標記的應用，其特征在于：具體方法包括以下步驟：

1）提取待測樣品的DNA；

2）采用分子標記進行PCR擴增；

3）進行電泳測試。

4.根據權利要求3所述的分子標記的應用，其特征在于：所述步驟2）中PCR擴增反應體系為：DNA工作液2μL、10×Buffer緩沖液2μL、dNTPs 0.8μL、DNA聚合酶0.4μL、正向引物和反向引物各0.2μL，用14.4μL ddH₂O將總體積補齊至20μL；PCR擴增反應程序：94℃預變性5 分鐘；94℃變性30 秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，35個循環；72℃延伸7 分鐘。

5.根據權利要求3所述的分子標記的應用，其特征在于：所述步驟3）中電泳測試用7%非變性聚丙烯酰胺凝膠進行電泳，硝酸銀染色后觀察。

6.根據權利要求3所述的分子標記的應用，其特征在于：所述步驟3）中能檢測出三帶條帶片段的為雄性可育辣椒品系，而檢測出兩帶條帶則是雄性不育的辣椒品系。