[發明專利]與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記及其應用

在審

• 申請號: 201910094416.7
• 申請日: 2019-01-31
• 公開（公告）號: CN109593878A
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發明（設計）人: 樂軍
• 申請（專利權）人: 綠亨科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 王珂

本發明涉及一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記，所述的分子標記P?05?112的引物序列為：P?05?112F：5’?ACTGGGGAACACTTACGGC?3’；P?05?112R：5’?TCTCAGCAAGGGATTAAAGGC?3’；本發明還公開了其應用方法。本發明的有益效果為：不僅可以提高辣椒細胞核雄性不育在育種當中的利用效率，提高育種中選擇的準確性和效率，顯著縮短育種周期，還能降低育種制種成本。

技術領域

本發明涉及遺傳育種和分子生物學領域，具體來說，涉及一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記及其應用。

背景技術

辣椒是茄科(Solanaceae)辣椒屬(Capsicum)一年生或多年生草本植物。廣泛栽培于全球各地，是一種世界范圍內具有重要經濟價值的蔬菜作物，也是人們飲食生活中非常重要的一種調味品。據中國?遵義第二屆國際辣椒博覽會發布的相關信息，我國辣椒種植面積占世界辣椒種植總面積的 35%；近 3 年平均年產量 2800 萬噸，占世界辣椒總產量的46%；年產值逾 700 億元，辣椒產業已成為我國最大的蔬菜產業。

辣椒雜種優勢非常明顯，利用雄性不育系制種可以省去人工去雄，有效地降低雜種種子生產成本，保證種子的純度，并有利于保護知識產權。大多數蔬菜作物自然突變的雄性不育僅有一種遺傳類型，但在辣椒上同時存在細胞核不育型和核質互作不育型（細胞質不育），因此辣椒是研究植物雄性不育育性表達很好的試驗材料。細胞質雄性不育（cytoplasmic male sterility，CMS）的育性由細胞質和細胞核基因共同控制，可以育成100% 不育的雄性不育系，利用較方便，但父本的恢復基因主要分布在小果型辣椒中，普遍栽培的大果型辣椒中恢復系較難找到，選育優良的雜交品種較困難；辣椒細胞核雄性不育（genic male sterility，GMS）育性僅受細胞核基因控制，不受細胞質影響，目前報道的大多為 1 對隱性核基因控制，只能育成雄性不育兩用系，在制種時需撥除 50% 的可育株，但辣椒細胞核雄性不育育性較穩定，遺傳簡單便于利用，且普通的自交系均能使雜種的育性全部恢復，育種中父本來源廣泛，便于育成優良的雜交品種。

到目前為止，國內外研究者已發現的辣椒細胞核雄性不育基因近 20 個（ms1 --ms15, msk, msc-1，msc-2），其中msc-1 和 msc-2是由國內學者發現并利用的不育基因，但是這些基因之間的關系、基因是否相同等均不清楚。目前僅有ms1 和msc-1育性控制基因被克隆出來，在連鎖標記開發方面，國內外研究者對 5 個 ms 基因（ms1、 ms3 、ms8 、ms10、msc-1）進行了定位或開發了連鎖標記。除了msc-1開發了一個基因標記之外，其余與ms基因連鎖的分子標記要么連鎖距離較遠要么標記使用成本較高，在適用性上還有待提高。

針對相關技術中的問題，目前尚未提出有效的解決方案。

發明內容

針對相關技術中的上述技術問題，本發明的目的是提供一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記及其應用，克服現有產品中上述方面的不足。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現：

一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記，所述的分子標記P-05-112的引物序列為：

P-05-112F：5’- ACTGGGGAACACTTACGGC-3’；

P-05-112R：5’- TCTCAGCAAGGGATTAAAGGC-3’。

一種與辣椒細胞核雄性不育基因緊密連鎖的分子標記P-05-112的應用，所述分子標記應用于辣椒細胞核雄性不育品系的輔助選擇育種。

進一步的，所述分子標記應用的方法包括以下步驟：

1）提取待測樣品的DNA；

2）采用分子標記進行PCR擴增；