[發(fā)明專利]一種以Fe3O4@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910093340.6
• 申請日: 2019-01-30
• 公開（公告）號: CN109765386A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蘇秀霞;劉歡;彭正華;張婧;張海寧;徐佳;晏春苗;胡金龍
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

1.一種以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)取上玻片及下玻片，將上玻片及下玻片進(jìn)行酸處理，使其表面產(chǎn)生羥基，然后沖洗后吹干；

2)將上玻片浸入DMOAP水溶液中進(jìn)行浸泡，再沖洗后吹干；同時將下玻片放置于含TEM和DMOAP的乙醇溶液中浸泡，然后沖洗后吹干；

3)將天蠶素B抗體溶液滴加到下玻片表面，并放置在28℃-40℃的溫度下溫育，再沖洗后吹干；

4)將Fe₃O₄@Au和天蠶素B的復(fù)合溶液滴加到下玻片上，再放置于28℃-40℃的溫度下溫育，然后沖洗后吹干；

5)將上玻片放置于下玻片上，其中，上玻片與下玻片之間用聚酯片隔開，聚酯片的中部開設(shè)有空腔，該空腔的一側(cè)開口，再將熱致型液晶加熱使其呈各向同性的液態(tài)，然后將熱致型液晶從開口處注入到所述空腔內(nèi)，使得熱致型液晶注滿整個空腔，再冷卻至室溫，得液晶池，然后利用偏光顯微鏡觀察液晶池光學(xué)信號的顏色及亮度，以實(shí)現(xiàn)對天蠶素B的檢測。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟1)中，將上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃-100℃的溫度下浸泡，使其表面產(chǎn)生羥基。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟2)中，DMOAP水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1-0.4％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟2)中，下玻片在60℃-80℃乙醇溶液中浸泡，乙醇溶液中TEM與DMOAP體積比為3:1。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟3)中，天蠶素B抗體溶液的濃度為75ng/mL。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟3)中，溫育時間為3-5h；步驟4)中，溫育時間為1.5-3h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟4)中，F(xiàn)e₃O₄@Au和天蠶素B的復(fù)合溶液制備方法為：取Fe₃O₄@Au溶液，調(diào)節(jié)pH到天蠶素B等電點(diǎn)，加入天蠶素B溶液，混合搖勻靜置，得到Fe₃O₄@Au和天蠶素B的復(fù)合溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟5)中，熱致型液晶采用液晶5CB，將液晶5CB加熱至40℃-50℃，使液晶5CB呈各向同性的液態(tài)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟5)中，聚酯片采用Mylar聚酯片。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的以Fe₃O₄@Au為信號放大器檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟1)中，分別通過乙醇及去離子水進(jìn)行清洗，然后用N₂吹干；步驟2)中，上玻片用超純水進(jìn)行沖洗，然后用N₂吹干；下玻片用超純水及乙醇進(jìn)行沖洗，然后用N₂吹干；步驟3)中，用超純水進(jìn)行沖洗，然后用N₂吹干；步驟4)中分別用PBS緩沖液及超純水進(jìn)行沖洗，然后用N₂吹干。