[發(fā)明專利]一種含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910092225.7
• 申請(qǐng)日: 2019-01-30
• 公開（公告）號(hào): CN109879977B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊立群;林坤華;易菊珍;李春龍;毛旭宏;江桂生
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類號(hào): C08B33/00
• 分類號(hào): C08B33/00;C08B37/00;C08B37/02;A61K38/28;A61K9/14;A61K47/42;A61P3/10
• 代理公司: 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 44102
• 代理人: 陳衛(wèi)

1.一種葡萄糖響應(yīng)性的藥物/兩親性多糖衍生物納米粒在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述葡萄糖響應(yīng)性的藥物/兩親性多糖衍生物納米粒，將含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物，進(jìn)一步在臨界聚集濃度時(shí)得到納米粒，負(fù)載藥物后得到具有葡萄糖響應(yīng)性的藥物/兩親性多糖衍生物納米粒；

所述含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如式（I）所示：

式（I）；

所述兩親性多糖衍生物中膽固醇基團(tuán)的取代度為0.02，植物凝集素基團(tuán)的取代度為0.006，兩親性多糖衍生物中膽固醇基團(tuán)和植物凝集素基團(tuán)的數(shù)量比為10:3；

所述兩親性多糖衍生物的制備方法為，將羧基化多糖衍生物與膽固醇反應(yīng)，得到含膽固醇的兩親性多糖衍生物；再加入1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺進(jìn)行活化，然后加入猝滅劑猝滅未與兩親性多糖衍生物羧酸基團(tuán)反應(yīng)的1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亞胺，隨后加入植物凝集素進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后滴加羥胺，反應(yīng)溶液經(jīng)透析、冷凍干燥得到含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述藥物為胰島素。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述多糖為普魯蘭、支鏈淀粉、瓜爾膠、香菇多糖、直鏈淀粉或糖原。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一所述應(yīng)用，其特征在于，所述植物凝集素為黑豆凝集素、綠豆凝集素、刀豆凝集素、花生凝集素、鷹嘴豆凝集素、菜豆凝集素或四棱豆凝集素。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述兩親性多糖衍生物的制備方法具體包括如下步驟：

S1.按照羧基化多糖衍生物：有機(jī)溶劑I=0.1～1g：10～30mL的比例，將羧基化多糖衍生物溶于有機(jī)溶劑I中；

S2.按照膽固醇：有機(jī)溶劑I=0.1～1.0g：10～50mL的比例，將膽固醇溶于有機(jī)溶劑I，緩慢滴加到S1得到的溶液中；再按照DCC：DMAP：有機(jī)溶劑I=0.1～1.0g：0.1～1.0g：1～100mL的比例，將DCC和DMAP溶于有機(jī)溶劑I中，緩慢滴加到S1得到的溶液中，于室溫油浴繼續(xù)攪拌反應(yīng)1～24h；

S3.上述反應(yīng)結(jié)束后，在反應(yīng)液中滴加有機(jī)溶劑II，離心，收集沉淀；將沉淀溶于有機(jī)溶劑I，再滴加有機(jī)溶劑II，離心，收集沉淀，重復(fù)溶解-沉淀過程2～3次；

S4.將S3得到的沉淀置于反應(yīng)容器中，待有機(jī)溶劑揮發(fā)后，加入蒸餾水，攪拌至分散均勻，透析，冷凍干燥得到含有膽固醇的兩親性多糖衍生物；

S5.按照兩親性多糖衍生物：緩沖溶液=0.1～1g：1～10mL，將S4所述兩親性多糖衍生物溶于緩沖溶液中；

S6.按照植物凝集素：緩沖溶液=0.01～0.05g：1～10mL，將植物凝集素溶于含金屬離子的緩沖溶液中，4℃放置1～30h；

S7.按照EDC：NHS：緩沖溶液=0.01～0.05g：0.1～0.5g：1～10mL，將EDC和NHS溶解于緩沖溶液中，再加入到S5得到的溶液中，室溫?cái)嚢杌罨?～30min；

S8.向S7得到的溶液中加入巰基乙醇，反應(yīng)1～10h，加入S6得到的溶液，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1～24h；

S9.向S8得到的溶液滴加10%羥胺水溶液，室溫反應(yīng)1～24h，反應(yīng)溶液透析，冷凍干燥得到含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物；

步驟S5、S6和S7中所述緩沖溶液的pH=4～7。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述應(yīng)用，其特征在于，所述葡萄糖響應(yīng)性的藥物/兩親性多糖衍生物納米粒的制備方法，包括如下步驟：

S1.按照含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物：緩沖溶液=0.001～0.1g：10～100mL，將含有膽固醇和植物凝集素基團(tuán)的兩親性多糖衍生物溶于緩沖溶液中；

S2.按照胰島素：緩沖溶液=0.001～0.05g：1～50mL，將胰島素溶于緩沖溶液中，再加入到S1得到的溶液中，混合攪拌1～24h；

S3.將步驟S2得到的溶液進(jìn)行離心，沉淀即為胰島素/兩親性多糖衍生物納米粒。