[發(fā)明專利]Au@Fe3

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910091195.8
• 申請日: 2019-01-30
• 公開（公告）號: CN109682964B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設計）人: 楊占軍;胡銳宣;劉靳一蒙;吳昕玥;李娟
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/531;G01N21/76;B82Y40/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 董旭東;徐素柏

本發(fā)明涉及一種Au@Fe₃O₄MNPs?Ab₂納米酶檢測探針的制備方法及檢測多組分抗原的方法,本發(fā)明首先合成的Au@Fe₃O₄納米粒子探針，成功將其應用于構建納米酶信號放大的化學發(fā)光陣列免疫傳感器。其次，將不同的捕獲抗體固定于免疫陣列傳感器不同的固相界面，然后分別通入抗原樣品和Au@Fe₃O₄MNPs?Ab₂納米信號放大探針，在線溫育形成穩(wěn)定的夾心免疫反應復合物，通入化學發(fā)光底物后所產生的光信號由電荷耦合CCD相機收集，實現(xiàn)了納米酶催化信號放大的多組分抗原化學發(fā)光免疫檢測，適用于多種分析物抗原的同時檢測。該分析方法具有檢測成本低、樣品消耗少、耗費時間短、穩(wěn)定性好、操作簡單等優(yōu)點，為家禽疾病的臨床檢測提供了一個深具前景的檢測平臺。

技術領域

本發(fā)明涉及生物分子化學發(fā)光免疫檢測分析技術領域，特別涉及一種Au@Fe₃O₄MNPs-Ab₂納米酶檢測探針的制備方法及其發(fā)光陣列檢測多組分抗原的方法。

背景技術

化學發(fā)光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay,CLIA），是具有高靈敏度的化學發(fā)光與高特異性的免疫反應相結合的分析方法，是在傳統(tǒng)放射性免疫分析、酶聯(lián)免疫分析、熒光免疫分析以及時間分辨熒光免疫分析等免疫分析方法之后發(fā)展起來的一種新的檢測微量抗原和抗體的新型標記免疫分析技術。化學發(fā)光成像免疫分析是目前化學發(fā)光免疫分析檢測中最受關注的方法之一，結合了化學發(fā)光免疫分析與成像技術，兼具化學發(fā)光免疫分析的優(yōu)點和成像分析通量高，能多組分同時檢測的優(yōu)點。已被成功用于檢測蛋白質、激素、細胞因子等微量物質，在疾病的診斷、檢測機體免疫功能狀況、監(jiān)測治療效果和監(jiān)測病情中也發(fā)揮重要的作用。為提高免疫分析的靈敏性，通常借用納米材料作為信號放大的載體。

相較于天然酶在保存過程中因其結構的變化很容易喪失催化活性，而且其催化活性也會因為大分子肽的活性位點被包埋而影響其它催化活性。而模擬酶具有合成制備簡單，較好的穩(wěn)定性，不易受環(huán)境溫度等影響，修飾方法簡易等優(yōu)點。因此研究并發(fā)展穩(wěn)定和高效的模擬酶十分必要。

在免疫分析的實際應用中，常采用平行測定多個單組分分析法實現(xiàn)對復雜樣品中多組分含量的測定，這種方法通常伴隨著操作繁瑣、分析成本高、耗時費力等缺點。目前，多組分免疫分析技術在免疫分析領域中引起了人們極大地研究興趣，其克服了傳統(tǒng)分析模式的不足，在單個分析流程中實現(xiàn)多組分的同時檢測，具有分析效率高、試劑消耗少、所需時間短，分析成本低等優(yōu)點。

發(fā)明內容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術中化學發(fā)光免疫分析中為提高分析靈敏性而使用的納米材料放大載體的催化活性受限的問題，提供一種Au@Fe₃O₄MNPs-Ab₂納米酶檢測探針的制備方法，以制得一種Au與二Fe₃O₄聯(lián)體結構的納米酶檢測探針，使Fe₃O₄的催化活性不受阻擋，提高檢測靈敏性。

為實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明Au@Fe₃O₄MNPs-Ab₂納米酶檢測探針的制備方法，包括以下步驟：