[發(fā)明專利]一種從地木耳提取分離對(duì)羥基苯甲醛的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910091022.6
• 申請(qǐng)日: 2019-01-30
• 公開（公告）號(hào): CN109627153B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐笑天;段小群;王宇暉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 桂林醫(yī)學(xué)院;桂林美銳生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07C45/78
• 分類號(hào): C07C45/78;C07C45/79;C07C47/565
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 邢賢冬;徐冬濤

本發(fā)明公開了一種從地木耳提取分離對(duì)羥基苯甲醛的方法，包括：取地木耳干品，以70～95％乙醇為提取試劑，回流提取，提取液濃縮至無醇味，得到浸膏；浸膏進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚—乙酸乙酯梯度洗脫，TLC檢測(cè)，合并得到組分Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9、Fr.10；Fr.9上大孔吸附樹脂柱，以甲醇一水為洗脫液梯度洗脫，按照洗脫梯度收集餾分，每個(gè)餾分濃縮至完全干燥，得到亞組分Fr.9.1、Fr.9.2、Fr.9.3；亞組分Fr.9.2、Fr.9.3分別采用半制備高效液相色譜分離純化，得到對(duì)羥基苯甲醛純品，純度達(dá)98％，得率為0.5％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)提取分離領(lǐng)域，涉及一種從地木耳提取分離抗炎活性成分對(duì)羥基苯甲醛的方法。

背景技術(shù)

地木耳，學(xué)名為普通念珠藻(Nostoc commune)，是一種固氮藍(lán)藻，平時(shí)所見的是其原植體，它外由膠被包裹，內(nèi)由藻絲彎曲、相互纏繞而成。地木耳是一種藥食兩用食材，性涼，味甘，入肝經(jīng)。清熱明目，收斂益氣。主治目赤紅腫、夜盲、燙火傷、久痢、脫肛等病癥。地木耳含有多種營(yíng)養(yǎng)成分，其蛋白質(zhì)含量高于雞蛋、木耳、銀耳等，總氨基酸含量與發(fā)菜、香菇相近，還含有多種維生素和水溶性多糖。地木耳具有一定的抑菌、抗腫瘤、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)作用以及抗氧化損傷等功效，有較大的開發(fā)和應(yīng)用前景。

地木耳含有的化學(xué)成分復(fù)雜多樣，主要含有多糖、生物堿、萜類化合物、β-紫羅蘭酮衍生物及酚酸等。目前對(duì)其生物堿部分研究較多，藻青素及還原型藻青素都有微弱的抗炎作用。為了進(jìn)一步明確地木耳其他類型的抗炎活性成分，非常有必要對(duì)地木耳進(jìn)行抗炎化合物的分離和開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明首次以地木耳為原料，從中提取分離出抗炎活性成分對(duì)羥基苯甲醛。

本發(fā)明的技術(shù)方案是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種從地木耳提取分離對(duì)羥基苯甲醛的方法，包括以下步驟：

步驟(1)、取地木耳干品，以體積分?jǐn)?shù)70～95％乙醇水作為提取試劑，回流提取1～4次，每次提取1～5小時(shí)，合并提取液，減壓濃縮至無醇味，得到浸膏；

步驟(2)、浸膏進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚—乙酸乙酯為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，根據(jù)TLC檢測(cè)，合并得到10個(gè)組分，記為Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4、Fr.5、Fr.6、Fr.7、Fr.8、Fr.9、Fr.10；

步驟(3)、組分Fr.9上大孔吸附樹脂柱，以10％、30％、50％甲醇一水為洗脫液梯度洗脫，按照洗脫梯度收集餾分，減壓濃縮至完全干燥，得到亞組分Fr.9.1、Fr.9.2、Fr.9.3；

步驟(4)、亞組分Fr.9.2、Fr.9.3分別采用半制備高效液相色譜分離純化，采用C₁₈色譜柱(5μm，10×250mm)，流動(dòng)相為10％～50％的甲醇一水，流速為4mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)210和280nm，等度洗脫，收集19～23min之間的色譜峰，得到對(duì)羥基苯甲醛純品。

步驟(1)中，所述的地木耳干品與提取試劑的質(zhì)量體積比為1:4～6g/mL。

優(yōu)選的，所述的提取試劑優(yōu)選為體積分?jǐn)?shù)95％乙醇水；回流提取2次，每次提取2小時(shí)。

步驟(2)中，硅膠柱層析采用200-300目硅膠。

所述的石油醚—乙酸乙酯的體積比為20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、1:3、0:1。

步驟(3)中，非極性大孔吸附樹脂對(duì)對(duì)羥基苯甲醛的分離效果明顯優(yōu)于中等極性和大極性吸附樹脂，因此，大孔吸附樹脂為非極性大孔吸附樹脂，優(yōu)選為HP-20大孔吸附樹脂或D101大孔吸附樹脂，進(jìn)一步優(yōu)選為HP-20大孔吸附樹脂。