[發明專利]同時測定牛奶中磺胺類、喹諾酮類、四環素類、氯霉素類、大環內酯類抗生素殘留量的方法

在審

• 申請號: 201910090101.5
• 申請日: 2019-01-18
• 公開（公告）號: CN109856271A
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 方靈;傅建煒;韋航;蘇德森;吳妙鴻;劉文靜;黃彪
• 申請（專利權）人: 福建省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1. 一種同時測定牛奶中磺胺類、喹諾酮類、四環素類、氯霉素類、大環內酯類抗生素殘留量的方法，其特征在于：包括如下步驟：

一、標準溶液的配制

1）準確稱取14種磺胺類標準品、15種喹諾酮類標準品、4種四環素類標準品、3種氯霉素類標準品、2種大環內酯類標準品，分別用甲醇溶解并定容至10mL，得到濃度為1 mg/mL的不同標準品儲備液；

2）準確量取不同標準品儲備液各0.1 mL，置于同一10 mL容量瓶中，加甲醇混勻并定容，配成濃度為10 μg/mL的混合標準品溶液；

3）準確移取一定量的混合標準品溶液，配成系列標準品溶液；

二、樣品溶液的制備

1）準確稱取1.00 g待測牛奶樣品，加入5 mL 0.5%（v/v）甲酸乙腈溶液，漩渦震蕩后超聲10 min，再以5000 r/min離心5 min，取上清液；

2）取2 mL上清液加入QuEChERS試劑盒中，漩渦振蕩1 min后，以5000 r/min離心5 min，取所得上清液0.5 mL，加入0.5 mL超純水稀釋混勻，經0.22 μm濾膜過濾，得樣品溶液；

三、超高效液相色譜-串聯質譜測定

1）將系列標準品溶液分別進行UPLC-MS/MS測定，然后以各目標組分的濃度與其對應的響應峰面積繪制標準曲線，并計算得到線性回歸方程；

2）將樣品溶液進行UPLC-MS/MS測定，再利用線性回歸方程計算樣品中殘留抗生素的含量。

2. 根據權利要求1所述同時測定牛奶中磺胺類、喹諾酮類、四環素類、氯霉素類、大環內酯類抗生素殘留量的方法，其特征在于：超高效液相色譜的檢測條件為：Waters AcquityUPLC TSS T3色譜柱，規格為100 mm×2.1 mm，1.8 μm；流速為0.4 mL/min；柱溫為40 ℃；進樣量為2 μL；流動相A為0.1%（v/v）甲酸水溶液，流動相B為甲醇；梯度洗脫，其洗脫程序為：0.00-0.20min，流動相A的體積為95%，0.20-2.50min，流動相A的體積由95%降低至50%，2.50-4.50min，流動相A的體積由50%降低至5%，4.50-4.51min，流動相A的體積由5%提升至95%，4.51-8.00min，流動相A的體積維持在95%；

質譜的檢測條件為：電噴霧離子源；磺胺類、喹諾酮類、四環素類、大環內酯類抗生素為正離子模式，毛細管電壓：2.5 kV；氯霉素類為負離子模式，毛細管電壓：-2.5 kV；多反應監測模式；離子源溫度：150 ℃；脫溶劑溫度：600 ℃；脫溶劑氣和錐孔氣均為氮氣，流速分別為1000 L/h，150 L/h；碰撞氣為氬氣（純度>99.999%），流速為0.15 mL/min。