[發(fā)明專(zhuān)利]人源化肝臟動(dòng)物模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910085265.9
• 申請(qǐng)日: 2019-01-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109735485B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 饒秀茸;黃益;易艷瓊;李泓彥
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳市拓普生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N5/071
• 分類(lèi)號(hào): C12N5/071;A01K67/027
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 潘霞

1.一種人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

將人源肝祖細(xì)胞注射入肝臟經(jīng)部分切除的免疫缺陷動(dòng)物中，得到人源化肝臟動(dòng)物模型，其中，所述免疫缺陷動(dòng)物為免疫缺陷小鼠，所述免疫缺陷動(dòng)物的被切除的肝臟的質(zhì)量為所述免疫缺陷動(dòng)物原始肝臟的質(zhì)量的50％～60％，所述人源肝祖細(xì)胞的用量為1×10⁷個(gè)/只動(dòng)物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，還包括所述人源肝祖細(xì)胞的獲取步驟：

將人干細(xì)胞在肝細(xì)胞分化培養(yǎng)基中進(jìn)行誘導(dǎo)分化，其中，所述肝細(xì)胞分化培養(yǎng)基中包括肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、纖維生長(zhǎng)因子及表皮生長(zhǎng)因子。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積濃度為10μg/L～40μg/L；所述纖維生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積濃度為10μg/L～20μg/L；所述表皮生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積濃度為10μg/L～20μg/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子與所述纖維生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積濃度比為2：0.5～4，所述肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子與所述表皮生長(zhǎng)因子的質(zhì)量體積濃度比為1：0.5～2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述免疫缺陷小鼠選自Nude小鼠、SCID小鼠、NOD-SCID小鼠、NSI小鼠、NCG小鼠、Rag2小鼠及IL2RG小鼠中的一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的人源化肝臟動(dòng)物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述免疫缺陷動(dòng)物為NCG小鼠。

7.權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的人源化肝臟動(dòng)物模型在肝病藥物篩選和藥效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用。