[發明專利]臭七次生代謝物及其制備方法與其在制藥中的應用

有效

• 申請號: 201910084942.5
• 申請日: 2019-01-29
• 公開（公告）號: CN110452278B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 張穎君;朱宏濤;尚佳歡;王東;楊崇仁
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: C07J7/00
• 分類號: C07J7/00;C07J9/00;C07D307/16;A61P29/00;A61K31/575;A61K31/57;A61K31/341
• 代理公司: 昆明祥和知識產權代理有限公司 53114
• 代理人: 馬曉青

1.如下結構式所示的臭七次生代謝物2，4-7，

2.如權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7，其特征在于該5個化合物來源于臭七的次生代謝物。

3.抗炎藥物組合物，其含有權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7單體或混合物作為有效成分，并至少包含一種藥學上可接受的載體。

4.權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7的制備方法，其特征在于該方法是將風干的臭七粉碎，60℃條件下甲醇回流提取3次，過濾，濾液經真空濃縮去除有機溶劑，上大孔樹脂層析柱，以純水洗脫去除多糖，再用甲醇洗脫得皂苷粗品，皂苷粗品上硅膠層析柱，用氯仿︰甲醇體積比為7︰3的溶劑洗脫，得三個部分A，B和C；B部分繼續上RP-18，用甲醇︰水體積比從1︰9到9︰1的溶劑進行梯度洗脫，得到8個部分B1-B8，將B1繼續上硅膠層析柱，用氯仿︰甲醇體積比10︰1的溶劑洗脫得4個部分B1.1-B1.4，將B1.2上RP-18半制備柱層析，用甲醇︰水體積比從1︰1到9︰1的溶劑洗脫、濃縮干燥得化合物2；B4部分上硅膠層析柱，用氯仿︰甲醇體積比200︰1的溶劑洗脫、濃縮干燥得化合物7；B5部分上硅膠層析柱，氯仿︰甲醇體積比200︰1到50︰1的溶劑洗脫得5個部分B5.1-B5.5，B5.5部分經半制備高效液相色譜儀純化，經乙腈︰水體積比43:57的溶劑洗脫、濃縮干燥得化合物4；B7部分上硅膠柱層析，氯仿︰甲醇體積比200︰1到50︰1的溶劑洗脫得5個部分B7.1-B7.5，B7.3部分上RP-18層析柱，甲醇︰水體積比為50:50的溶劑洗脫、濃縮干燥得化合物6；并經半制備高效液相色譜儀純化，用乙腈︰水體積比43:57的溶劑洗脫、濃縮干燥得化合物5。

5.權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7在制備預防炎癥性病變的藥物中的應用。

6.權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7在制備治療炎癥性疾病的藥物中的應用。

7.權利要求3所述的藥物組合物在制備預防炎癥性病變的藥物中的應用。

8.權利要求3所述的藥物組合物在制備治療炎癥性疾病的藥物中的應用。

9.權利要求1所述的臭七次生代謝物2，4-7對抑制小鼠單核巨噬細胞株RAW264.7一氧化氮產生的影響評價方法，其特征在于該方法是將小鼠單核巨噬細胞株RAW264.7接種于96空板中，接種密度為1.5×10⁵個細胞/孔，化合物2，4-7分別溶解于DMSO溶劑中，制備出濃度為50μM的溶液及其連續梯度稀釋溶液，之后進行細胞處理，每個處理設3個重復，用濃度為1μg/mL的肉毒素LPS進行刺激，18小時后采用Griess試劑對上清液中的一氧化氮生成進行評價，于570nm處檢測吸收值，采用Reed-Muench法計算各化合物的半抑制濃度IC₅₀值；同時，采用一氧化氮合成酶抑制劑NG-Methyl-l-arginine醋酸鹽，半抑制濃度IC₅₀＝39.26±0.91μM作為陽性對照。