[發明專利]銀離子檢測方法、銀離子檢測試劑盒及用于檢測銀離子的核酸適配體有效
| 申請號： | 201910084331.0 | 申請日： | 2019-01-29 |
| 公開（公告）號： | CN109810979B | 公開（公告）日： | 2020-10-23 |
| 發明（設計）人： | 劉巍;楊麗娟;于凱利 | 申請（專利權）人： | 新鄉醫學院 |
| 主分類號： | C12N15/115 | 分類號： | C12N15/115;G01N33/53 |
| 代理公司： | 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224 | 代理人： | 林青中 |
| 地址： | 453099 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 銀離子 檢測 方法 試劑盒 用于 核酸 適配體 | ||
1.一種銀離子檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
提供待測樣品；
將所述待測樣品與氧化石墨烯、雙鏈特異性核酸外切酶和帶有熒光標記的核酸適配體混合得到混合物，所述核酸適配體為如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；
將所述混合物在35～40℃條件下孵育5～40min，然后進行失活處理以使所述雙鏈特異性核酸外切酶失活；
檢測所述失活處理后的混合物的熒光強度，并根據所述熒光強度確定所述待測樣品中銀離子的濃度。
2.根據權利要求1所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述混合物中所述氧化石墨烯的濃度為5～15μg/mL。
3.根據權利要求1所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述混合物中所述雙鏈特異性核酸外切酶的濃度為30～50U。
4.根據權利要求1所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述混合物在35～40℃條件下的孵育時間為15～25min。
5.根據權利要求1所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述混合物中所述帶有熒光標記的核酸適配體的濃度為40～60nmol/L。
6.根據權利要求1～5任一項所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述熒光標記為羧基熒光素。
7.根據權利要求6所述的銀離子檢測方法，其特征在于，檢測所述失活處理后的混合物的熒光強度的條件為：激發波長為490～498nm，發射波長為510nm～650nm，入射狹縫的寬度為1～10nm，出射狹縫的寬度為1～10nm。
8.根據權利要求1～5任一項所述的銀離子檢測方法，其特征在于，所述雙鏈特異性核酸外切酶為核酸外切酶III。
9.一種銀離子檢測試劑盒，其特征在于，包括氧化石墨烯、雙鏈特異性核酸外切酶和帶有熒光標記的核酸適配體，所述核酸適配體為如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
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