[發明專利]一種不含甲氨喋呤和含甲氨蝶呤的聚乙二醇化聚L-賴氨酸-羥基喜樹堿納米粒的制備方法

有效

• 申請號: 201910083697.6
• 申請日: 2019-01-29
• 公開（公告）號: CN109833484B
• 公開（公告）日: 2021-03-19
• 發明（設計）人: 陶曉軍;凡學龍;楊小平;陳瑤;王榮;楊珊伊
• 申請（專利權）人: 湖南師范大學
• 主分類號: A61K47/60
• 分類號: A61K47/60;A61K47/64;A61K47/69;A61K9/51;A61K47/34;A61K31/519;A61K31/4745;A61P35/00
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 盧宏;周棟

本發明公開了一種不含氨甲喋呤和含甲氨蝶呤的聚乙二醇化聚L?賴氨酸?羥基喜樹堿納米粒的制備方法。所述方法是將PEG和HCPT接枝在PLL骨架上，形成PPH；將PPH在不存在或存在MTX的情況下進行自組裝透析，分別形成PPH NPs和MTX?PPHNPs。

技術領域

本發明涉及一種不含甲氨喋呤和含甲氨蝶呤的聚乙二醇化聚L-賴氨酸-羥基喜樹堿納米粒的制備方法。

背景技術

癌癥是一種危及生命的疾病。世界衛生組織(WHO)報道，惡性腫瘤已成為21世紀人類的“第一殺手”。目前，化療藥物仍然是所有分期癌癥專利的一線治療方法。它們對殺死癌細胞非常有效，但也能殺死正常細胞。由化療引起的嚴重的全身細胞毒性和免疫抑制卻抵消了治療的益處并縮短了癌癥患者的壽命。因此，戰略性提高化療藥物療效和減少副作用仍在積極研究中。在目前的研究中，我們設計了一種納米粒子來攜帶10-羥基喜樹堿(HCPT)和甲氨蝶呤(MTX)，并進一步探索兩種藥物組合的抗癌作用。

CPT是醌類生物堿(即喜樹堿)的衍生物，分離自中國樹木喜樹，屬于天然抗癌藥物。作為DNA拓撲異構酶I抑制劑，它抑制DNA復制進入S期細胞周期，導致不可逆轉的DNA鏈破壞，誘導細胞凋亡。在CPT的衍生物中，HCPT已被用于治療不同類型的癌癥，包括原發性肝癌，胃癌，結腸直腸癌，膀胱癌，頭頸部上皮癌和白血病。HCPT的副作用如骨髓抑制，中性粒細胞減少，泌尿系統損害和引起嚴重腹瀉都有文獻記載。

嘌呤和嘧啶合成的需要葉酸，這也是DNA合成的需要。甲氨蝶呤(MTX)可競爭性抑制二氫葉酸還原酶(DHFR)。甲氨蝶呤對DHFR的親和力是葉酸的1000倍。DHFR催化二氫葉酸轉化為具有活性的四氫葉酸酯，這是嘌呤和嘧啶合成的一種共酶。MTX可抑制核苷堿的合成，由于這種基礎結構的消耗可減少DNA的合成。MTX是一類屬于抗代謝的化療藥物。它被用于治療多種癌癥，其中包括結直腸癌。與其他一般的化療藥物一樣，MTX也會阻止正常細胞的正常工作，導致骨髓抑制和免疫細胞毒性等副作用。

聯合使用兩種及兩種以上化療藥物是治療腫瘤轉移的有效方法。這種作用可以是協同作用、加性作用或抑制作用，因為多種藥物可以在不同的途徑中抑制腫瘤生長或誘導腫瘤細胞凋亡。聯合用藥可以減少單個藥物的劑量和副作用。據報道，氟嘧啶/葉酸(5-FU/LV)聯合伊立替康(喜樹堿衍生物)或奧沙利鉑可延長IV期癌癥患者的壽命。胸腺嘧啶是DNA復制所需的核苷，而5-Fu作為亞氨酸合成酶(TS)可抑制劑阻止胸腺嘧啶的合成。因為5-Fu和MTX有類似的抗腫瘤使用途徑；本發明嘗試制備一種包載HCPT及MTX的納米粒子，結合兩種藥物來檢驗其抗腫瘤作用。

發明內容

本發明旨在克服現有技術的不足，提供一種不含甲氨喋呤和含甲氨蝶呤的聚乙二醇化聚L-賴氨酸-羥基喜樹堿納米粒的制備方法。

為了達到上述目的，本發明提供的技術方案為：

所述不含甲氨喋呤和含甲氨蝶呤的聚乙二醇化聚L-賴氨酸-羥基喜樹堿納米粒的制備方法，其特征在于，所述方法是將PEG和HCPT接枝在PLL骨架上，形成PPH；將PPH在不存在或存在MTX的情況下進行自組裝透析，分別形成PPH NPs和MTX-PPHNPs；所述PEG為聚乙二醇，所述HCPT為10-羥基喜樹堿，所述PLL為聚-L-賴氨酸，所述PPH為聚乙二醇聚-L-賴氨酸羥基喜樹堿聚合物，所述MTX為甲氨蝶呤，所述PPH NPs為PPH納米顆粒所述MTX-PPH NPs為負載MTX的PPH納米顆粒。

上述方法具體包括如下步驟：

(1)合成PEG-g-PLL；

(2)合成10-HCPT-SA；

(3)將PEG-g-PLL與10-HCPT-SA反應合成PPH；