[發(fā)明專利]一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910075938.2 | 申請日： | 2019-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN109628378B | 公開（公告）日： | 2020-07-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張慧君;杜勇;陳太標(biāo) | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇豐華生物制藥有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 224165 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 花生 蛋白酶 培養(yǎng) cho 細(xì)胞 方法 | ||
1.一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法，其特征在于：利用含有花生蛋白酶解物的無血清培養(yǎng)基對TNK-tPA表達(dá)CHO細(xì)胞株進(jìn)行流加培養(yǎng)，所述流加培養(yǎng)前，將TNK-tPA表達(dá)CHO細(xì)胞株在谷氨酰胺培養(yǎng)基中的繁殖；所述花生蛋白酶解物的水解度大于50%，相對于無血清培養(yǎng)基的終濃度為1 .0-4 .0mg/ml；所述花生蛋白酶解物由下述方法制得：
(1)脫脂花生在中性條件下，由中性蛋白酶水解，獲得中性蛋白水解物；
(2)將中性蛋白水解物在堿性條件下，由堿性蛋白酶二次水解，經(jīng)過超濾、脫鹽、冷凍干燥獲得花生蛋白酶解物；
所述含有花生蛋白酶解物的無血清培養(yǎng)基中不含谷氨酰胺。
2.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法，其特征在于： 所述終濃度為2 .0-4 .0mg/ml。
3.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法，其特征在于： 所述終濃度為4 .0mg/ml。
4.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法，其特征在于： 所述中性條件為pH 6 .5-7 .5。
5.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法，其特征在于：所述堿性條件為pH 7 .5-8 .5。
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