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[發(fā)明專利]一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法有效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201910075938.2 申請日: 2019-01-25
公開(公告)號: CN109628378B 公開(公告)日: 2020-07-17
發(fā)明(設(shè)計)人: 張慧君;杜勇;陳太標(biāo) 申請(專利權(quán))人: 江蘇豐華生物制藥有限公司
主分類號: C12N5/071 分類號: C12N5/071
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 224165 江蘇省*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 一種 利用 花生 蛋白酶 培養(yǎng) cho 細(xì)胞 方法
【權(quán)利要求書】:

1.一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法,其特征在于:利用含有花生蛋白酶解物的無血清培養(yǎng)基對TNK-tPA表達(dá)CHO細(xì)胞株進(jìn)行流加培養(yǎng),所述流加培養(yǎng)前,將TNK-tPA表達(dá)CHO細(xì)胞株在谷氨酰胺培養(yǎng)基中的繁殖;所述花生蛋白酶解物的水解度大于50%,相對于無血清培養(yǎng)基的終濃度為1 .0-4 .0mg/ml;所述花生蛋白酶解物由下述方法制得:

(1)脫脂花生在中性條件下,由中性蛋白酶水解,獲得中性蛋白水解物;

(2)將中性蛋白水解物在堿性條件下,由堿性蛋白酶二次水解,經(jīng)過超濾、脫鹽、冷凍干燥獲得花生蛋白酶解物;

所述含有花生蛋白酶解物的無血清培養(yǎng)基中不含谷氨酰胺。

2.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法,其特征在于: 所述終濃度為2 .0-4 .0mg/ml。

3.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法,其特征在于: 所述終濃度為4 .0mg/ml。

4.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法,其特征在于: 所述中性條件為pH 6 .5-7 .5。

5.如權(quán)利要求1所述的一種利用花生蛋白酶解物培養(yǎng)CHO細(xì)胞的方法,其特征在于:所述堿性條件為pH 7 .5-8 .5。

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1、專利原文基于中國國家知識產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

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