[發(fā)明專利]一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910073383.8 | 申請日： | 2019-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN111485012B | 公開（公告）日： | 2023-06-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 朱篤;張遷;肖依文;汪涯;高波良 | 申請（專利權(quán)）人： | 江西科技師范大學(xué) |
| 主分類號： | C12P33/20 | 分類號： | C12P33/20;C12N1/14;A23L27/10;A61K8/63;A61Q19/00;A61K47/28;C12R1/645 |
| 代理公司： | 南昌大牛知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 36135 | 代理人： | 孫林 |
| 地址： | 330100 江西省南昌市新*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 甘草 發(fā)酵 制備 葡萄 糖醛酸 方法 | ||
1.一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：直接采用甘草為原料進(jìn)行發(fā)酵，得到單葡萄糖醛酸甘草次酸，發(fā)酵方法為固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵菌種為植?物內(nèi)生真菌?ChaetomiumglobosumDX-THS3?或?Microsphaeropsi?sarundinis?DX-SES3，其中，Chaetomium?globosumDX-THS3?已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為?湖北省武漢市武漢大學(xué)，保藏日期為?2016?年?1?月?4?日，保藏號為?CCTCC?NO:M?2016005，Microsphaeropsisarundinis?DX-SES3?已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址?為湖北省武漢市武漢大學(xué)，保藏時(shí)間為?2014?年?5?月?3?日，保藏號為?CCTCCNO:M2014177；
所述一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法包括以下步驟：
1)種子培養(yǎng)?步驟?1)所述種子培養(yǎng)具體是：液體種子培養(yǎng)基在?121℃滅菌?25min，將植物內(nèi)生真?菌菌種接種至液體種子培養(yǎng)基，28℃、180rpm?搖床培養(yǎng)?72h，得種子液；
2)固態(tài)培養(yǎng)基的配制?步驟?2)所述固態(tài)培養(yǎng)基的配制具體是：將購得的中藥材甘草清洗、烘干、粉碎，?以甘草為主要原料，添加麥麩、稻殼、玉米芯、米糠中的一種或多種，并添加含碳源、氮源以及無機(jī)離子的培養(yǎng)液，充分?jǐn)嚢杌靹蚝螅虘B(tài)培養(yǎng)基在?121℃滅菌25min，隨后?冷卻至室溫，所述碳源為葡萄糖、蔗糖、果糖或乳糖，所述氮源為硝酸銨、蛋白胨、酵母粉、酵母膏、牛肉膏或硝酸鈉；
3)接種發(fā)酵?步驟?3)所述接種發(fā)酵具體是：滅菌后，接入種子液，接菌量為培養(yǎng)基總重量的?1％?-30％，在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)，發(fā)酵過程中，培養(yǎng)基根據(jù)菌株特性維持在最適溫度范圍內(nèi)，即20℃-35℃，固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)7-30d?后，可得到產(chǎn)率較高的?GAMG，且有較高的?β-D-葡萄糖醛酸苷酶酶活。
2.如權(quán)利要求?1?所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：所述的甘草為豆科、甘草屬多年生草本烏拉爾甘草、脹果甘草和光果甘草的根?及根莖，以及各種粉碎規(guī)格、含有甘草酸的植株組織或其干燥提取物。
3.如權(quán)利要求?1-2?任一項(xiàng)所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：還包括以下步驟：
4)分離純化?步驟?4)所述分離純化具體是：步驟?3)獲得的發(fā)酵產(chǎn)物用氨性醇浸泡、提取，即得?GAMG?的提取液，經(jīng)分離純化、真空減壓濃縮、真空或噴霧干燥后，獲得高產(chǎn)率的GAMG?的混合物或單體。
4.如權(quán)利要求?3?所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：步驟?1)所述液體種子培養(yǎng)基的制備方法為：稱取?200g?馬鈴薯，洗凈去皮切成小塊，加水煮沸?20～30?分鐘，用八層紗布過濾，加葡萄糖?20g，攪拌混勻，稍冷卻后再?補(bǔ)足水分至1000mL，分裝至三角瓶，加塞、包扎。
5.如權(quán)利要求?3?所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：步驟?2)所述固態(tài)培養(yǎng)基中，甘草添加量占比為?80％以上。
6.如權(quán)利要求?3?所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：步驟?2)所述含碳源、氮源以及無機(jī)離子的培養(yǎng)液的成分為：碳源?5～10g/L；所?述氮源1～3g/L；KH?2?PO?4?1.2～2.2g/L；NaCl?0.5～5g/L；硫酸鎂0.1～0.5g/L；?ZnSO?4?·7H?2O?0.002～0.05g/L；MnSO?4?·7H?2?O?0.001～0.004g/L；余量為水，?初始?pH?5～7。
7.如權(quán)利要求?3?所述的一種甘草發(fā)酵制備單葡萄糖醛酸甘草次酸的方法，其特征在于：步驟?4)中所述氨性醇為含?0.1％-2％(v/v)氨水的?10％-60％(v/v)甲醇溶液或含0.1％-2％(v/v)氨水的?10％-60％(v/v)乙醇溶液。
8.采用權(quán)利要求?1-7?任一項(xiàng)方法制備得到的含單葡萄糖醛酸甘草次酸的混合甜味劑或單葡萄糖醛酸甘草次酸單體在食品、化妝品、藥品中的應(yīng)用。
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