[發明專利]水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基的抗原表位、其抗體及應用有效
| 申請號： | 201910073042.0 | 申請日： | 2019-01-25 |
| 公開（公告）號： | CN109627306B | 公開（公告）日： | 2021-10-15 |
| 發明（設計）人： | 朱嵐;何瑩;曾漢來;羅雅 | 申請（專利權）人： | 華中農業大學 |
| 主分類號： | C07K14/415 | 分類號： | C07K14/415;C07K16/16;G01N33/68 |
| 代理公司： | 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231 | 代理人： | 徐紹新 |
| 地址： | 430070 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 水稻 籽粒 谷蛋白 glua2 抗原 抗體 應用 | ||
1.一種水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基的抗原表位，其多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.權利要求1所述的抗原表位在制備水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基多克隆抗體中的應用。
3.一種水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基多克隆抗體的制備方法，其特征在于：首先對權利要求1中所述多肽的氨基酸序列進行末端修飾，在所述的氨基酸序列的C端增加一個半胱氨酸殘基，然后將修飾后的多肽經過固相合成并與載體蛋白偶聯，得到抗原，用抗原免疫動物后，取動物的多抗血清并從中分離純化多克隆抗體。
4.根據權利要求3所述的多克隆抗體制備方法，其特征在于：修飾后的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.根據權利要求3所述的多克隆抗體制備方法，其特征在于：所述載體蛋白為鑰孔戚血蘭蛋白，偶聯劑為琥珀酰亞胺-4-環已烷-1-碳酸酯。
6.根據權利要求3所述的多克隆抗體制備方法，其特征在于：所述純化方法為親和層析法。
7.根據權利要求3-6任何一項所述的制備方法得到的多克隆抗體。
8.權利要求7所述的多克隆抗體在檢測水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基中的應用。
9.一種檢測水稻籽粒谷蛋白GluA2亞基的方法，其特征在于包括以下步驟：
1）提取稻米籽粒總蛋白；
2）進行聚丙烯酰胺凝膠電泳，并電轉移至硝酸纖維素膜上；
3）以權利要求7所述的多克隆抗體為一抗，辣根過氧化物酶標記山羊抗兔IgG為二抗，進行免疫印跡檢測，
所述多克隆抗體是用所述抗原免疫兔得到的多克隆抗體。
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