[發明專利]化學發光-免疫層析試紙及其檢測方法

在審

• 申請號: 201910071113.3
• 申請日: 2019-01-25
• 公開（公告）號: CN109765363A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 周軍;王健斌;龔貽洲;曾生
• 申請（專利權）人: 武漢璟泓萬方堂醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/543;G01N21/76;G01N21/84
• 代理公司: 武漢河山金堂專利事務所(普通合伙) 42212
• 代理人: 胡清堂

1.化學發光-免疫層析試紙，其特征在于：包括帶外殼(1)的層析試紙(2)以及與層析試紙(2)配套使用的加液管(3)，加液管(3)內裝有用于滴加至試紙上后反應并化學發光顯色的溶液。

2.根據權利要求1所述的化學發光-免疫層析試紙，其特征在于：所述加液管(3)中的溶液為兩種或以上的顯色反應試劑。

3.根據權利要求2所述的化學發光-免疫層析試紙，其特征在于：所述加液管(3)的上下端部分別為按壓端(31)和滴液端(32)，所述按壓端(31)和滴液端(32)之間布置有多個獨立儲存顯色反應試劑的儲液腔(33)，所述按壓端(31)的內面布置有刺針(34)，用于一次性同時刺破多個所述儲液腔(33)及滴液端(32)。

4.根據權利要求3所述的化學發光-免疫層析試紙，其特征在于：所述加液管(3)的主體為圓柱形，主體下端部漸縮成倒錐形為滴液端(32)，所述加液管(3)內的多個儲液腔(33)沿軸向切面平行布置。

5.根據權利要求3所述的化學發光-免疫層析試紙，其特征在于：外殼(1)包括依次開設的加樣孔(11)、檢測視窗(12)、吸樣墊視窗(13)，加樣孔(11)與層析試紙(2)上的樣品墊(21)對應，檢測視窗(12)與層析試紙(2)上硝酸纖維素膜(22)包被的檢測線、質控線對應，吸樣墊視窗(13)與層析試紙(2)上的吸樣墊(23)對應，用于觀察樣本是否到達吸樣墊(23)，當待測液通過加樣孔(11)滴入層析試紙(2)上反應完成后，通過加液管(3)向加樣孔(11)下的樣品墊(21)上滴加發光顯色溶液，使得檢測線、質控線顯色。

6.根據權利要求1～5任一所述的化學發光-免疫層析試紙的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟

S1、將待測樣品滴加至層析試紙(2)上，當樣品為陽性時，檢測線上會生成復合物；

S2、按壓加液管(3)，使得加液管(3)內的溶液混合后滴入層析試紙(2)的樣品墊(21)上，并向吸樣墊(23)方向移動，當與檢測線上的復合物反應后發光；

S3、將步驟S2發光的層析試紙放入熒光檢測系統的暗盒內，再開啟電源開關(18)，計時器(16)開始計時，通過光電倍增管(14)收集檢測線上的光，并通過CPU電路板(15)的控制，顯示屏(17)顯示相關信息，繪制標準曲線計算待測抗原的含量。

7.根據權利要求6所述的化學發光-免疫層析試紙的檢測方法，其特征在于：步驟S1中，當樣品墊(21)上噴涂有吖啶酯標記的抗體1，硝酸纖維素膜(22)的檢測線上包被抗體2，樣本為陽性時，硝酸纖維素膜(22)的檢測線上生成固定的抗體1-抗原樣本-吖啶酯標記抗體1的復合物；步驟S2中，加液管(3)的兩個儲液腔(33)內分別儲存的是100μl～1000μl的50mM氫氧化鈉溶液、100μl0.9％過氧化氫。

8.根據權利要求6所述的化學發光-免疫層析試紙的檢測方法，其特征在于：步驟S1中，當樣品墊(21)上噴涂有堿性磷酸酶標記的抗體或抗原，硝酸纖維素膜(22)的檢測線上包被抗體2，當樣本為陽性時，硝酸纖維素膜(22)的檢測線上生成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物；步驟S2中，加液管(3)的一個儲液腔33儲存的是AMPPD發光劑緩沖液，堿性磷酸酶使AMPPD脫去磷酸根基團而發光。

9.根據權利要求6所述的化學發光-免疫層析試紙的檢測方法，其特征在于：步驟S1中，當樣品墊(21)上噴涂有用辣根過氧化物酶標記的抗體或抗原，在與反應體系中的待測標本和固相載體發生免疫反應后，形成固相包被抗體-待測抗原-酶標記抗體復合物；步驟S2中，加液管(3)的三個儲液腔(33)內分別儲存的是魯米諾發光劑、H₂O₂、發光增強劑。