[發(fā)明專利]鑒別獼猴桃品種的DNA條帶及基于其的快速鑒定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910058830.2
• 申請日: 2019-01-22
• 公開（公告）號: CN109929944B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 解巧利;嚴(yán)飛;王云鵬;朱永生;賴江華;魏曙光;張洪波;張寶
• 申請（專利權(quán)）人: 西安交通大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

1.一種快速鑒別市售獼猴桃品種的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)以待測獼猴桃DNA為模板，對待測獼猴桃的不同DNA分子標(biāo)記進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增，對擴增產(chǎn)物進行電泳檢測；

2)若電泳結(jié)果中存在與DNA分子標(biāo)記對應(yīng)的DNA條帶，則對擴增產(chǎn)物進行測序，對測序結(jié)果比對分析后，通過堿基序列的差異進行鑒定；

若測序結(jié)果為SEQ.ID.NO.1所示的DNA堿基序列中115bp，132bp和310bp為C且206bp和215bp為G則為黃金果、川黃金和紅陽中的一種；若115bp，132bp和310bp為T且206bp和215bp為A，則為海沃德、徐香、金艷、華優(yōu)、秦美、翠玉、翠香、亞特或鳳仙樓；

若測序結(jié)果為SEQ.ID.NO.2所示的DNA堿基序列中534bp為G則為金艷，若534bp為A則為紅陽、黃金果、川黃金、海沃德、徐香、華優(yōu)、秦美、翠玉、翠香、亞特或鳳仙樓；若擴增產(chǎn)物777bp為C則為翠玉，若777bp為A則為其他紅陽、黃金果、川黃金、海沃德、徐香、華優(yōu)、秦美、金艷、翠香、亞特或鳳仙樓；

其中，核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示的DNA條帶在擴增時以Seq01和Seq02作為引物對，Seq01具有如SEQ.ID.NO.3所示的核苷酸序列，Seq02具有如SEQ.ID.NO.4所示的核苷酸序列；核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示的DNA條帶在擴增時以Seq03和Seq04作為引物對，Seq03具有如SEQ.ID.NO.5所示的核苷酸序列，Seq04具有如SEQ.ID.NO.6所示的核苷酸序列。

2.一種快速鑒別市售獼猴桃品種的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)對待測獼猴桃的大小、首尾形態(tài)、表皮毛以及橫縱切面形態(tài)進行鑒定；

2)以待測獼猴桃DNA為模板，對待測獼猴桃的不同DNA分子標(biāo)記進行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴增，對擴增產(chǎn)物進行電泳檢測；

3)若電泳結(jié)果中存在與DNA分子標(biāo)記對應(yīng)的DNA條帶，則對擴增產(chǎn)物進行測序，對測序結(jié)果比對分析后，通過堿基序列的差異進行鑒定；

若測序結(jié)果為SEQ.ID.NO.1所示的DNA堿基序列中115bp，132bp和310bp為C且206bp和215bp為G則為黃金果、川黃金和紅陽中的一種；若115bp，132bp和310bp為T且206bp和215bp為A，則為海沃德、徐香、金艷、華優(yōu)、秦美、翠玉、翠香、亞特或鳳仙樓；

若測序結(jié)果為SEQ.ID.NO.2所示的DNA堿基序列中534bp為G則為金艷，若534bp為A則為紅陽、黃金果、川黃金、海沃德、徐香、華優(yōu)、秦美、翠玉、翠香、亞特或鳳仙樓；若擴增產(chǎn)物777bp為C則為翠玉，若777bp為A則為其他紅陽、黃金果、川黃金、海沃德、徐香、華優(yōu)、秦美、金艷、翠香、亞特或鳳仙樓；

其中，核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示的DNA條帶在擴增時以Seq01和Seq02作為引物對，Seq01具有如SEQ.ID.NO.3所示的核苷酸序列，Seq02具有如SEQ.ID.NO.4所示的核苷酸序列；核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示的DNA條帶在擴增時以Seq03和Seq04作為引物對，Seq03具有如SEQ.ID.NO.5所示的核苷酸序列，Seq04具有如SEQ.ID.NO.6所示的核苷酸序列。

3.如權(quán)利要求2所述的快速鑒別市售獼猴桃品種的方法，其特征在于，步驟1)中，區(qū)分紅陽、黃金果、川黃金、海沃德、徐香、金艷、華優(yōu)、秦美、翠玉、翠香、亞特和鳳仙樓的形態(tài)如下：