[發(fā)明專利]一株假單胞菌及其在石油降解中的應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910051201.7
• 申請日: 2019-01-21
• 公開（公告）號: CN109593687A
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 戴柏平;張曉林
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州造品科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12N11/12;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/38;C02F101/32
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本發(fā)明公開一株假單胞菌Pseudomonadaceae sp.GR5，已于2018年7月16日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址，中國，武漢，武漢大學，保藏號CCTCC M 2018488。以庫爾勒塔中油田污染土壤中篩選得到，菌株GR5呈球桿狀，革蘭氏結(jié)果呈陰性，經(jīng)16sRNA鑒定為假單胞菌。經(jīng)過人工馴化將該菌種馴化到原油濃度高達60g/L時依然能夠正常生長繁殖。本發(fā)明的石油降解菌在最適溫度30℃，最佳PH7.0的條件下降解20天，對含原油20g/L的液體培養(yǎng)基中原油降解率達到84.4%，原油降解率極高，具有很大的應用前景。可以應用于微生物修復去除土壤和水體環(huán)境中的原油污染等領(lǐng)域。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種假單胞菌GR5及其在石油降解中的應用。

背景技術(shù)

在原油的開采、煉制、運輸和使用過程中，不可避免的會發(fā)生石油的泄露，進入環(huán)境造成污染。對河流、土壤、地下水以及海洋等環(huán)境造成嚴重污染。在陸地，原油污染一般由開采鉆屑油泥、輸油管道破裂等造成；在海洋中，油井溢油、油船泄露造成。據(jù)統(tǒng)計全世界平均每年有600-1000萬噸原油通過各種途徑進入環(huán)境。之后通過物理化學作用方式向周圍擴散至更大范圍。原油的化學組成復雜，包括烷烴、環(huán)烷烴、芳香烴、瀝青質(zhì)等多種物質(zhì)有毒物質(zhì)。其中一些多環(huán)芳烴具有致癌、致畸、致突變作用，其可以通過食物鏈最終進入人體，危害人類健康。

目前，石油污染的去除方法主要有三種：物理方法、化學方法和生物方法。物理方法主要是焚燒法、隔離法和換土法，成本高，不能將污染物完全去除。化學方法主要是萃取法、洗滌法和化學氧化法，污染物去除不徹底，容易引起二次污染。生物方法是指利用生物的生命代謝活動降解石油污染物（主要是微生物），其處理效果好、成本低、對環(huán)境影響較小，具有較好的應用前景。

雖然,生物法治理石油污染環(huán)境已經(jīng)有了大量的研究，但是，目前，應用于石油污染處理的降解菌生長速率緩慢、降解率低，降解速率緩慢，不能達到理想的降解效果。為了取得高效、徹底的生物修復效果，分離和篩選石油污染物的高效降解菌的生物修復的必然要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是在于提供一株降解石油烴的菌株GR5(假單胞菌Pseudomonassp. GR5),已于2018年7月16日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址，中國，武漢，武漢大學，保藏編號CCTCC N0:M2018488。

本發(fā)明的目的在于提供上述石油降解菌GR5的應用。

所述應用具體為將Pseudomonadaceae sp. GR5菌液直接投加到石油污染的水體或者土壤中；或?qū)?Italic>Pseudomonadaceae sp. GR5固定到載體上制備成菌劑，再將菌劑施用到石油污染的水體或者土壤中。

本發(fā)明的另一個目的是提供一種降解石油烴的固體菌劑，所述固體菌劑的活性成分包括菌株GR5，保藏號CCTCC M 2018488。

所述固體菌劑為將Pseudomonadaceae sp. GR5固定到載體上制備成的菌劑。

進一步地，所述載體為玉米秸稈，粉碎粒徑≤200微米的無菌秸稈。

進一步地，所述載體的處理方法為高壓蒸汽滅菌處理，將滅菌后的秸稈于40-50℃烘干至恒重，粉碎機粉碎過40目篩，在蒸餾水中浸泡2h，調(diào)節(jié)pH7-8，至于40-50℃烘干至恒重。

進一步地所述菌劑中Pseudomonadaceae sp. GR5有效活菌數(shù)與秸稈比例為0.5ｘ10⁹-2ｘ10⁹個/克。