[發明專利]一株假單胞菌及其在石油降解中的應用

在審

• 申請號: 201910051201.7
• 申請日: 2019-01-21
• 公開（公告）號: CN109593687A
• 公開（公告）日: 2019-04-09
• 發明（設計）人: 戴柏平;張曉林
• 申請（專利權）人: 杭州造品科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12N11/12;B09C1/10;C02F3/34;C12R1/38;C02F101/32
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1.一種假單胞菌GR5，保藏號為CCTCC M 2018488。

2.權利要求1所述的假單胞菌GR5在降解石油中的應用。

3.根據權利要求2所述的假單胞菌 GR5的應用，其特征在于：所述應用具體為將假單胞菌菌液直接投加到石油污染的水體或土壤中；或將假單胞菌固定到載體上制備成菌劑，再將菌劑施用到石油污染的水體或土壤中。

4.權利要求1所述的假單胞菌GR5在生物修復原油污染土壤中的應用。

5.權利要求1所述的假單胞菌GR5在生物修復原油污染的水體中的應用。

6.一種降解石油烴的菌劑，其特征在于：所述菌劑的活性成分為假單胞菌GR5，保藏號CCTCC M 2018488。

7.根據權利要求6所述的菌劑，其特征在于：所述菌劑為將假單胞菌GR5固定到載體上制備成的固體菌劑。

8.根據權利要求7所述的菌劑，其特征在于：所述載體為玉米秸稈，粉碎粒徑≤200微米的無菌秸稈。

9.根據權利要求7所述的菌劑，其特征在于：所述載體的處理方法為高壓蒸汽滅菌處理，將滅菌后的秸稈于40-50℃烘干至恒重，粉碎機粉碎過40目篩，在蒸餾水中浸泡2h，調節pH7-8，至于40-50℃烘干至恒重。

10.根據權利要求7所述的菌劑，其特征在于：菌劑中假單胞菌GR5有效活菌數與秸稈比例為0.5ｘ10⁹-2ｘ10⁹個/克。

11.根據權利要求7所述的菌劑，其特征在于：所述固體菌劑的制備方法為將假單胞菌GR5菌液與秸稈直接混合均勻，得到混合菌劑。

12.根據權利要求6所述的菌劑，其特征在于：菌劑為凍干菌劑，制備方法如下：將假單胞菌GR5菌液中加入150-300g/L甘油混勻，再與秸稈直接混合均勻，置于真空冷凍干燥儀中進行干燥處理，得到凍干菌劑。

13.根據權利要求12所述的菌劑，其特征在于：所述真空冷凍干燥的參數為-44℃預冷2h，升溫至-34℃升華10h，繼續升溫到31℃，即得到凍干菌劑。

14.權利要求6-13任一所述菌劑用于石油污染土壤修復的使用方式為：保持土壤30%-35%的含水量，按照每立方米土壤3kg菌劑的用量進行菌劑的播種，對土壤進行翻耕，使之與菌劑充分混合。

15.權利要求1所述假單胞菌GR5應用于石油降解的菌液處于對數生長期或穩定期，其密度為1ｘ10¹⁰-2ｘ10¹⁰個/ml。

16.權利要求1所述假單胞菌GR5的培養方法為：采用LB液體培養基，配方為：氯化鈉10g/L，蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L；培養條件為溫度30℃，pH7.0，培養時間60h，轉速150rpm。