[發明專利]豬圓環病毒3型Cap重組蛋白及其編碼基因和應用有效
| 申請號: | 201910046124.6 | 申請日: | 2019-01-18 |
| 公開(公告)號: | CN109762052B | 公開(公告)日: | 2022-03-08 |
| 發明(設計)人: | 白娟;李勇;姜辰龍;姜平;周而璇 | 申請(專利權)人: | 南京農業大學 |
| 主分類號: | C07K14/01 | 分類號: | C07K14/01;C12N15/34;C12N15/63;G01N33/68;C07K16/08 |
| 代理公司: | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人: | 賈波 |
| 地址: | 210014 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 圓環 病毒 cap 重組 蛋白 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.一種豬圓環病毒3型Cap重組蛋白的編碼基因,其特征是:將PCV3 ORF2基因中表達第1-120位氨基酸的基因片段刪除而得,該基因的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一種重組質粒,其特征是:由權利要求1所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白的編碼基因和載體重組而得。
3.一種豬圓環病毒3型Cap重組蛋白,其特征是:由權利要求2所述的重組質粒表達而得。
4.根據權利要求3所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白,其特征是:所述豬圓環病毒3型Cap重組蛋白通過將權利要求2所述的重組質粒轉化至Rosseta感受態細胞,然后IPTG誘導表達而得。
5.根據權利要求3所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白,其特征是:其氨基酸序列如SEQID NO.3所示。
6.一種PCV3豬多克隆抗體,其特征是按照下述方法制得:
(1)以純化的權利要求3、4或5所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白為抗原,用其對豬進行免疫,每隔3周加強免疫一次;
(2)待豬血清中抗體的效價大于1:10000時取豬血,分離血清,將血清離心后取上清液,即為PCV3豬多克隆抗體。
7.根據權利要求6所述的PCV3豬多克隆抗體,其特征是:將純化的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白先用PBS稀釋成2 mg/mL,然后與等體積的ISA-206佐劑混合后充分乳化,然后再對豬進行免疫。
8.根據權利要求6所述的PCV3豬多克隆抗體,其特征是:每頭豬的免疫劑量為1mg豬圓環病毒3型Cap重組蛋白。
9.一種PCV3 間接ELISA抗體檢測試劑盒,其特征是:包括包被權利要求3、4或5所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白的酶標板。
10.一種PCV3 的間接ELISA抗體檢測方法,其特征是:包括采用純化的權利要求3、4或5所述的豬圓環病毒3型Cap重組蛋白包被酶標板的步驟,該檢測方法以非疾病的診斷和治療為目的。
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