[發明專利]一種生物活性肽N14-Desacetoxytubulysin H的制備方法

在審

• 申請號: 201910045273.0
• 申請日: 2019-01-17
• 公開（公告）號: CN109678929A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 吳正治;龍伯華
• 申請（專利權）人: 深圳市老年醫學研究所
• 主分類號: C07K5/117
• 分類號: C07K5/117;C07K1/16
• 代理公司: 北京華智則銘知識產權代理有限公司 11573
• 代理人: 陳向敏

本發明公開了一種生物活性肽N¹⁴?Desacetoxytubulysin H的制備方法，包括以下步驟：制備TUV片段(2)；制備生物活性肽N¹⁴?Desacetoxytubulysin H。本發明方法符合綠色化學標準：如利用可再生性資源、可回收、所用試劑毒性較小、反應經處理后對環境污染很小等；此外總產率高、立體選擇性非常好、成本低、分離純化簡單方便、可用于大量制備。

技術領域

本發明屬于藥物技術領域，具體地說，涉及一種生物活性肽N¹⁴-Desacetoxytubulysin H的制備方法。

背景技術

2000年，等人(Sasse,F.；Steinmetz,H.；Heil,J.；G.；Reichenbach,H.J.Antibiot.2000,53,879.)首次報導了一種從粘細菌中分離提取的線性四肽小分子。由于它們主要作用在細胞的微管蛋白細胞骨架(tubulin cytoskeleto)上，因此把這一類化合物命名為Tubulysins。

研究發現，Tubulysins不僅具有很高的抗癌活性(N¹⁴-Desacetoxytubulysin H的IC₅₀約為紫杉醇的100-5000倍，為埃博霉素B的10倍以上)，而且能夠有效地抑制耐藥性癌細胞的生長，但它的具體作用機理卻是與埃博霉素和紫杉醇相反，即促進微管蛋白的聚合。長春堿的作用機理雖與其相似，但活性差很多。另外，Kaur等人(G.Kaur,M.Hollingshead,S.Holbeck,et al.Biochem.J.2006,396,235-242.)還發現Tubulysins還具有抑制血管新生的作用。此外，在水溶性方面Tubulysins相比其它抗癌藥物有著明顯的優勢，其對特定的癌細胞表現出超強的抗癌活性，使其成為新型抗癌新藥研發中頗受關愛的目標分子之一(如表1所示)。

表1 N¹⁴-Desacetoxytubulysin H對人癌細胞的體外細胞毒活性

通過粘細菌發酵來實現生物合成，但只能合成很少量的Tubulysins，不到4毫克/升，而且還需要幾個非常繁瑣的純化步驟，因而不利于工業化生產。

從Tubulysins幾年很短的發展歷程看，Tubulysins以其獨有的生物活性正在受到越來越多人的關注，可能在未來的幾年會成為抗腫瘤藥物中的明星分子。但其在合成上并不理想，至今Tubulysis及其類似物化學合成上報道的文獻有幾十篇，而合成路線大部分不是很完美，存在很大進一步探索的空間。

因此，有必要提供一種簡潔，快速，可以大量合成Tubulysis的制備方法。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種生物活性肽N¹⁴-Desacetoxytubulysin H的制備方法。

為了解決上述技術問題，本發明公開了一種生物活性肽N¹⁴-DesacetoxytubulysinH的制備方法，包括以下步驟：

步驟1、制備TUV片段(2)；

步驟2、制備生物活性肽N¹⁴-Desacetoxytubulysin H。

可選地，所述步驟1中的制備TUV片段(2)具體為：

其合成路線為：

包括以下步驟：

步驟1.1、化合物10的合成：