[發明專利]胎盤血CIK細胞的培養方法在審
| 申請號： | 201910045233.6 | 申請日： | 2019-01-17 |
| 公開（公告）號： | CN109536445A | 公開（公告）日： | 2019-03-29 |
| 發明（設計）人： | 施琳 | 申請（專利權）人： | 匯麟生物科技（北京）有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0783 | 分類號： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李青 |
| 地址： | 100176 北京市北京經濟技*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 培養體系 胎盤血 細胞因子 細胞培養技術 基礎培養基 單核細胞 擴增效果 培養容器 自體血漿 培養基 包被 換液 活化 接種 細胞 | ||
1.一種胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，包括：
1)將由胎盤血分離得到的單核細胞接種于包被有CD3抗體及CD28抗體的培養容器中進行培養；培養體系中的細胞因子為IFN-γ900U/mL～1100U/mL；
2)向培養體系中加入IL-2，終濃度為900U/mL～1100U/mL；
3)換液，新的培養體系中的細胞因子為IL-2 900U/mL～1100U/mL；所述培養體系中的基礎培養基為含4％～6％自體血漿的VIVO培養基。
2.根據權利要求1所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，在步驟1)中，所述培養容器包被有CD3抗體及CD28抗體的方法為：
以所述培養面積為25cm2計，加入2.5～3.5mL含有CD3抗體400ng/mL～600ng/mL及CD28抗體400ng/mL～600ng/mL的包被液，在細胞培養條件下包被1.5h～2.5h。
3.根據權利要求2所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，所述包被液的溶劑為D-PBS。
4.根據權利要求1所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，在步驟1)中，所述培養體系中的基礎培養基為含4％～6％自體血漿的VIVO培養基。
5.根據權利要求4所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，在步驟1)中，以所述培養面積為25cm2計，培養基的加入量為8ml～12ml，細胞接種量為0.8×107～1.2×107。
6.根據權利要求5所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，步驟1)的培養時間為20h～28h。
7.根據權利要求1所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，步驟2)的培養時間為2d～4d。
8.根據權利要求1所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，在步驟3)中，將細胞傳代2～3次。
9.根據權利要求8所述的胎盤血CIK細胞的培養方法，其特征在于，步驟3)的培養時間為9d～11d。
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