[發明專利]一種免疫定量檢測方法和應用

有效

• 申請號: 201910042577.1
• 申請日: 2019-01-16
• 公開（公告）號: CN109781972B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 買制剛
• 申請（專利權）人: 深圳大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N33/58
• 代理公司: 深圳市順天達專利商標代理有限公司 44217
• 代理人: 郭偉剛

1.一種免疫定量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟S1、通過標準品和拮抗劑建立競爭指數-濃度的標準曲線方程；

步驟S2、檢測樣品的競爭指數，根據所述樣品的競爭指數利用所述標準曲線方程來計算樣品中待測抗原的濃度；

所述標準品中的抗原和所述樣品中的待測抗原包含第一抗體識別位點和第二抗體識別位點，不含第三抗體識別位點；所述拮抗劑中的抗原包含第一抗體識別位點和第三抗體識別位點，不含第二抗體識別位點；使用第一熒光物質標記所述第二抗體，使用第二熒光物質標記所述第三抗體；

所述步驟S1包括：

步驟S11、將所述標準品與所述拮抗劑的混合物與標記物液體反應，去除未反應的液體；

步驟S12、檢測所述第一熒光物質和所述第二熒光物質的熒光強度，計算競爭指數，所述競爭指數＝所述第一熒光物質的熒光強度/所述第二熒光物質的熒光強度；

步驟S13、改變所述標準品的濃度，重復步驟S11和步驟S12，得到對應的競爭指數；

步驟S14、利用標準品的濃度和對應的競爭指數繪制所述標準曲線方程；

所述步驟S2包括：

步驟S21、將所述樣品與所述拮抗劑的混合物與標記物液體反應，去除未反應的液體；

步驟S22、檢測所述第一熒光物質和所述第二熒光物質的熒光強度，計算競爭指數；

步驟S23、根據所述樣品的競爭指數和所述標準曲線方程來計算樣品中待測抗原的濃度。

2.根據權利要求1所述的免疫定量檢測方法，其特征在于，所述第三抗體可識別基因工程抗原標簽蛋白，不能識別所述標準品中的抗原和所述樣品中的待測抗原上的位點。

3.根據權利要求1所述的免疫定量檢測方法，其特征在于，使用特異反應的結合物和配體來代替所述第三抗體及其抗原位點。

4.一種通過權利要求1-3中任一項所述的免疫定量檢測方法在使用微孔板反應法定量檢測血清中降鈣素原中的應用。

5.一種通過權利要求1-3中任一項所述的免疫定量檢測方法在使用免疫層析法定量檢測血清中降鈣素原中的應用。