[發(fā)明專利]一種水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201910042414.3
• 申請日: 2019-01-17
• 公開（公告）號: CN109781919A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 彭婕;何力;甘金華;居小倩;陳建武
• 申請（專利權(quán)）人: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院長江水產(chǎn)研究所
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 董路;王敏鋒

1.一種水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于包括如下步驟：

1.1、甲胺磷母液的配制：

移取甲胺磷標(biāo)準品于容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度線，配制成甲胺磷母液，保存?zhèn)溆茫?/p>

1.2、乙酸銨溶液和混合溶液的配制：

將乙酸銨加入到混合溶劑中，配制成4-6mmol/L的乙酸銨溶液，混合溶劑中甲酸與水的體積比為0.0005-0.0015；

按照甲醇和乙酸銨溶液的體積比為1-3:7-9，將甲醇和乙酸銨溶液混合均勻，配制成混合溶液；

1.3、標(biāo)準工作液的配制：

用混合溶液將甲胺磷母液稀釋成N份不同甲胺磷濃度的標(biāo)準工作液，N為不小于4的正整數(shù)；

1.4、UPLC-MS/MS檢測：

色譜條件：

色譜柱為Thermo Hypersil GOLD C₁₈，流動相為有機相和水相的混合液，有機相為甲醇，水相為乙酸銨溶液，流動相采用梯度洗脫的方式進行洗脫，流動相流速為0.2-0.3mL/min；

將N份標(biāo)準工作液采用UPLC-MS/MS進行檢測，得到N份標(biāo)準工作液中甲胺磷的定量離子峰面積；

1.5、繪制標(biāo)準曲線：

以甲胺磷濃度為橫坐標(biāo)，以定量離子峰面積為縱坐標(biāo)，根據(jù)檢測的數(shù)據(jù)進行繪圖，擬合后得到標(biāo)準曲線，根據(jù)標(biāo)準曲線得到標(biāo)準曲線的函數(shù)關(guān)系式y(tǒng)＝k₁x+b₁；

1.6、樣品的制備：

將水產(chǎn)動物進行處理，取可食部分，將可食部分切塊后均質(zhì)，制得樣品，將樣品密封，并保存?zhèn)溆茫?/p>

1.7、樣品的提取：

向樣品中加入提取溶劑，混勻，在室溫下超聲提取，提取完成后離心，取上清液；

1.8、樣品的凈化：

向上清液中加入凈化劑，凈化劑中乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化碳黑粉和無水硫酸鎂的質(zhì)量比為1-3:0.5-1.5:5-7，凈化劑與上清液的質(zhì)量體積比為3-5g：50mL，混合均勻，離心，將上清液進行濃縮，得到前處理試樣；

1.9、樣品的測定：

將前處理試樣用混合溶液進行復(fù)溶，混合均勻，用水相微孔濾膜過濾，濾液即為待測試樣，將待測試樣用步驟1.4的檢測條件進行檢測，得到待測試樣中甲胺磷的定量離子峰面積，將待測試樣中甲胺磷的定量離子峰面積代入標(biāo)準曲線的函數(shù)關(guān)系式中，得到待測試樣中甲胺磷的濃度，將待測試樣中甲胺磷的濃度乘以待測試樣的體積，得到樣品中甲胺磷的質(zhì)量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于所述流動相梯度洗脫的條件為：

第一階段：采用有機相和水相的混合液洗脫0-2min，其中有機相的體積百分含量為10-20％，水相的體積百分含量為80-90％；

第二階段：采用有機相和水相的混合液洗脫5-7min，其中有機相的體積百分含量為80-90％，水相的體積百分含量為10-20％；

第三階段：采用有機相和水相的混合液洗脫3-5min，其中有機相的體積百分含量為10-20％，水相的體積百分含量為80-90％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于：所述的提取溶劑為乙腈、乙酸乙酯、乙酸體積百分含量為0.1的乙腈溶液或乙酸體積百分含量為0.1的乙酸乙酯溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于：所述的水相微孔濾膜的孔徑為0.22μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于：步驟1.7中，所述的離心為冷凍離心。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)品中甲胺磷殘留的快速檢測方法，其特征在于質(zhì)譜條件為：

離子源為加熱大氣壓電噴霧源，正離子模式掃描，選擇反應(yīng)監(jiān)測模式測定，噴霧電壓3000-4000V，蒸發(fā)溫度300-350℃，離子傳輸毛細管溫度300-350℃，鞘氣流速20-40L/min，輔助氣為3-15L/min，監(jiān)測離子對：定量離子m/z 142.0/95.0和定性離子m/z142.0/125.0。