[發明專利]一種葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的制備方法

在審

• 申請號: 201910039512.1
• 申請日: 2019-01-16
• 公開（公告）號: CN109512785A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 李資玲;熊向源;龔妍春;吳光杰
• 申請（專利權）人: 江西科技師范大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/22;A61K31/12;A61P35/00
• 代理公司: 南昌大牛專利代理事務所(普通合伙) 36135
• 代理人: 喻莎

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種葉酸?Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的制備方法，是以磷脂、膽固醇、葉酸?Pluronic F87和姜黃素為原料，采用薄膜分散法結合動態高壓微射流技術，經溶解、成膜、水化及動態高壓微射流等處理制備的葉酸?Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體。本方法制備的葉酸?Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的平均粒徑為81.0±2.9nm，分散系數為0.384±0.061，姜黃素包封率為88.6±1.4％。本發明制備的葉酸?Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體具有良好的緩釋性，在pH7.4條件下，經72h后有82.9％的姜黃素釋放出來，且葉酸修飾可增強姜黃素脂質體的細胞毒性。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的制備方法。

背景技術

姜黃素是一種從姜黃根莖中提出的一種多酚類植物化學物，具有抗腫瘤、改善心血管功能、抗炎、抗病毒、保肝、增強免疫力等生物活性。但是在實際應用過程中，由于姜黃素存在水溶性差、穩定性差、口服生物利用率低、以及體內易被代謝等缺陷，因此限制了其在食品和藥物當中的應用。納米載體如脂質體、納米粒子、膠囊、膠束、乳液等在藥物傳遞過程中顯示出巨大的潛力，通過納米載體包埋可提高姜黃素的生物利用率和擴大其使用范圍。

脂質體是由磷脂、膽固醇等組成的內部為水相、具有類細胞膜結構的雙分子層閉合囊泡。可以運載親水性和親脂性的物質，在生物醫藥、食品營養、化妝品等領域有廣泛的應用。Pluronic F87嵌段共聚物是一種已經商業化的產品，具有很好的生物相容性，Pluronic F87已經被美國食品與藥物管理局(FDA)批準使用。葉酸是人體所需的B族維生素，葉酸(FA)與腫瘤細胞表面過度表達的葉酸受體(Folate Receptor,FR)親和力高，因此通過葉酸與葉酸受體介導的靶向治療已成為國內外研究的熱點。

本發明以葉酸-Pluronic F87為修飾劑，采用薄膜分散法結合動態高壓微射流技術制備葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體，該法制備的葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體具有良好的緩釋性能，且增強了姜黃素的細胞毒性。

發明CN201510671604.3一種葉酸-殼聚糖修飾姜黃素納米脂質體的制備方法也公開了姜黃素納米脂質體的制備方法，其制備方法與本發明不同，本發明通過采用脫水縮合的方法將葉酸連接在Pluronic F87的一端，效果側重也與本發明不同，CN201510671604.3主要是側重于提高修飾后的緩釋特性，而本發明的主要是增強其對KB細胞的細胞毒性。

發明內容

本發明目的是為了針對現有姜黃素脂質體水溶性差、穩定性差、口服生物利用率低、以及體內易被代謝等不足，提供一種葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的制備方法，以提高姜黃素的細胞毒性，評價其緩釋性能，促進葉酸-Pluronic F87修飾姜黃素納米脂質體的開發。本發明的具體工藝步驟如下：

A、葉酸-Pluronic F87的合成：

(1)取葉酸(0.836g,1.9mmol)與1,3－二環己基碳二亞胺(0.367g,1.75mmol)于圓底燒瓶中，加入35mL經干燥的二甲基亞砜進行溶解，于室溫下攪拌24h；

(2)將干燥后的F87(14.6g,1.60mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.196g,1.60mmol)加入步驟1的圓底燒瓶中，繼續于室溫下攪拌48h；

(3)將步驟(2)所得的溶液于5000rpm離心5min,取上清液裝入截留分子量為3500Da的透析袋中，在DMSO環境中透析6h，以除去混合液中未反應的FA，繼續用超純水透析48h以除去溶液中的DMSO；