[發(fā)明專利]一種黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910036715.5
• 申請(qǐng)日: 2019-01-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111434218A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 武蕓;鄭小江;廖朝林;向戌蓮;王鋒;劉琴;楊澤娃;鄭宇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北民族學(xué)院;恩施土家族苗族自治州大地生物科技研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)無(wú)菌苗的獲得：取恩施黃精地下塊莖，洗凈后放于超凈臺(tái)上，用解剖刀將帶芽眼的塊莖切成方形小塊；用酒精震蕩沖洗黃精小塊莖28-32s后轉(zhuǎn)入0.1％的升汞溶液中消毒7～9min，然后用無(wú)菌水沖洗5～6次，再用吸水紙將消毒后黃精塊莖中的水吸干，之后接種到組成為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)29-31天后從芽眼長(zhǎng)出無(wú)菌苗；

(2)莖尖的培養(yǎng)：在解剖鏡下切下步驟(1)所獲得無(wú)菌苗的莖尖，接種到組成為1/2MS+6-BA0.5mg/L+0.7mg/LNAA的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)24-26天后長(zhǎng)出不定芽；

(3)不定芽的增值：將步驟(2)獲得的不定芽轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.2mg/L進(jìn)行增殖培養(yǎng)，培養(yǎng)30-40天后獲得長(zhǎng)度為到3～5cm的增殖叢生芽；

(4)壯苗培養(yǎng)：將步驟(3)獲得的增殖叢生芽切分成單株苗轉(zhuǎn)接到MS基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)約30～40天；

(5)生根培養(yǎng)：將經(jīng)過(guò)步驟(4)壯苗培養(yǎng)后的單株苗接種到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)20～30天，幼苗基部長(zhǎng)出3～8條根，繼續(xù)培養(yǎng)至50-60天，獲得生根數(shù)多、根長(zhǎng)、根壯的生根組培苗；

(6)移栽：將步驟(5)獲得的生根組培苗移栽到基質(zhì)中，在溫室中培育1個(gè)月后，再移到室外培育1個(gè)月便移栽至大田成苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，所述步驟(1)-(6)中各組培階段的培養(yǎng)條件是：光照強(qiáng)度為40μmol.m^-2.s^-1，光照時(shí)間12h/d，其中培養(yǎng)基pH5.8-6.0，培養(yǎng)溫度為20～21℃；蔗糖為25g/L，瓊脂為6.2g/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(1)中所述洗凈的過(guò)程為：首先將恩施黃精地下塊莖上的泥土洗凈，然后用洗潔精溶液浸泡8-12min，再用毛刷刷凈并用自來(lái)水沖洗，最后用蒸餾水沖洗2-4次。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(1)中所述方形小塊塊莖的長(zhǎng)度約0.5cm，所述酒精溶液的體積濃度為75％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(2)中切下的莖尖長(zhǎng)度為0.4-0.6mm。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(5)中所述的生根培養(yǎng)基為：1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.4mg/LNAA。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(6)中移栽前要對(duì)組培苗進(jìn)行馴化，具體為：在組培室中將培養(yǎng)瓶蓋第一天不全打開(kāi)，第二天再全部打開(kāi)，瓶中每天噴灑蒸餾水，馴化一周后再進(jìn)行移栽。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的恩施黃精品種復(fù)壯的組培快繁方法，其特征在于，步驟(6)中所述基質(zhì)由草炭:蛭石按體積比1:3配制而成。