[發(fā)明專利]中孕期母血清甲胎蛋白異質(zhì)體L2和L3篩查唐氏綜合征的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910030319.1
• 申請日: 2019-01-14
• 公開（公告）號: CN109920542A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳益明;辛然;盧莎;連結(jié)靜;梅瑾;顧琳媛;王昊;張艷珍;張聞;褚雪蓮;王敏;汪曉瑩;李俐瑤;殷一旋;毛愛芬
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院
• 主分類號: G16H50/30
• 分類號: G16H50/30
• 代理公司: 杭州九洲專利事務(wù)所有限公司 33101
• 代理人: 陳繼亮

本發(fā)明公開了一種中孕期母血清甲胎蛋白異質(zhì)體L2和L3篩查唐氏綜合征的方法，該方法包括如下步驟：收集經(jīng)羊水細(xì)胞染色體核型分析確診為DS胎兒的多個孕婦構(gòu)成病例組，隨機抽取胎兒發(fā)育正常的多個孕婦構(gòu)成對照組；采用酶聯(lián)免疫法檢測兩組孕婦血清的AFP?L2和AFP?L3水平，根據(jù)ROC曲線計算出AFP?L2、AFP?L3篩查DS胎兒的最佳臨界值、曲線下面積；檢測時，當(dāng)待測孕婦血清的AFP?L2和AFP?L3水平超過設(shè)定的閥值，則判定待測孕婦的胎兒為DS胎兒。本發(fā)明的有益效果為：中孕期母血清AFP?L2和AFP?L3的篩查DS胎兒具有較高的靈敏度和特異度，是篩查DS的較好標(biāo)志物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢測領(lǐng)域，主要是一種中孕期母血清甲胎蛋白異質(zhì)體L2和L3篩查唐氏綜合征的方法。

背景技術(shù)

唐氏綜合征(Down's Syndrome，DS)又稱21-三體綜合征、先天愚型，是新生兒出生缺陷常見的一類遺傳性疾病，是第21號染色體比正常人多出一條而導(dǎo)致以智力發(fā)育障礙為主要特征的綜合征^[1-2]。產(chǎn)前篩查是指通過簡便、經(jīng)濟和較少創(chuàng)傷的檢測方法，從母體血清中篩查胎兒患DS的風(fēng)險性^[3]，目前多采用中孕期母血清中甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、游離人絨毛膜促性腺激素β亞基(free β subunit of human chorionicgonadotropin，freeβ-HCG)、游離雌三醇(unconjugated Estradiol，uE3)等標(biāo)記物進行篩查^[4-5]。AFP作為DS產(chǎn)前篩查中主要標(biāo)志物之一已經(jīng)在各地常規(guī)開展，但檢測靈敏度均較低^[6]。血清中AFP與小扁豆素(lensculinarisagglutinin，LCA)結(jié)合后，經(jīng)電泳分成三帶，依次命名為AFP-L1、 AFP-L2、AFP-L3，即LCA非結(jié)合型(AFP-L1、AFP-L2)和LCA結(jié)合型(AFP-L3)^[7]。通常把與小扁豆素結(jié)合的AFP-L3稱為AFP異質(zhì)體，它是新一代的腫瘤標(biāo)志物^[8]。有研究表明AFP-L2或AFP-L3在篩查DS方面優(yōu)于 AFP^[9-10]，但有關(guān)AFP-L2和AFP-L3聯(lián)合篩查DS方面的報道較少見，因此，筆者選擇61例健康胎兒孕婦和88例產(chǎn)前診斷為DS胎兒的孕婦作為研究對象，探討母血清AFP-L2和AFP-L3水平與DS胎兒之間的關(guān)系及聯(lián)合篩查效率情況。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，而提供一種中孕期母血清甲胎蛋白異質(zhì)體L2和L3篩查唐氏綜合征的方法。

本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案來完成的。一種中孕期母血清甲胎蛋白異質(zhì)體L2和L3篩查唐氏綜合征的方法，該方法包括如下步驟：

(1)、收集經(jīng)羊水細(xì)胞染色體核型分析確診為DS胎兒的多個孕婦構(gòu)成病例組，隨機抽取胎兒發(fā)育正常的多個孕婦構(gòu)成對照組；

(2)、采用酶聯(lián)免疫法檢測兩組孕婦血清的AFP-L2和AFP-L3水平，使用AFP-L2、AFP-L3構(gòu)建風(fēng)險計算模型，根據(jù)ROC曲線計算出AFP-L2、AFP-L3篩查DS胎兒的最佳臨界值、曲線下面積；

(3)、檢測時，采用酶聯(lián)免疫法檢測待測孕婦血清的AFP-L2和AFP-L3水平，使用AFP-L2、AFP-L3 構(gòu)建的風(fēng)險計算模型進行篩查，當(dāng)待測孕婦血清的AFP-L2和AFP-L3水平超過設(shè)定的閥值，則判定待測孕婦的胎兒為DS胎兒。

風(fēng)險計算模型為：DS的風(fēng)險值通過將DS的年齡風(fēng)險值與對應(yīng)正態(tài)分布似然比值相乘計算，

年齡方程：risk_age＝0.000627+exp^{-16.2395+0.286*(age-0.5)}

其中risk_age為年齡風(fēng)險值，age為預(yù)產(chǎn)年齡