[發(fā)明專利]一種基于基因型選擇的比利時毛色家兔純化方法

有效

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• 申請日: 2019-01-11
• 公開（公告）號: CN109680075B
• 公開（公告）日: 2020-12-04
• 發(fā)明（設計）人: 樊新忠;喬西波;惠春暉;王波;楊愛國;胡家卿;李明勇
• 申請（專利權）人: 山東農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888
• 代理公司: 北京細軟智谷知識產(chǎn)權代理有限責任公司 11471
• 代理人: 張肖

本發(fā)明提供了一種基于基因型選擇的比利時毛色家兔純化方法，所述純化方法適用于肉兔、獺兔、長毛兔、觀賞兔等各類比利時毛色家兔的純化。本發(fā)明所述方法為：首先挑選出毛色表型為比利時毛色的家兔；隨后使用第一引物組、第二引物組和第三引物組，同時對ASIP基因、MC1R基因和TYR基因進行檢測，篩選出基因型為AA(對應ASIP基因)、EE(對應MC1R基因)和CC(對應TYR基因)的家兔。本發(fā)明所述純化方法得到基因型AAEECC的家兔為比利時毛色純合子，剔除了隱性白基因。利用本發(fā)明所述純化方法培育的比利時毛色家兔專門化品系，在保證商品代兔毛色一致的基礎上，能夠很好地保護育種企業(yè)的種質(zhì)材料。

技術領域

本發(fā)明屬于家畜育種技術領域，具體涉及一種基于基因型選擇的比利時毛色家兔純化方法。

背景技術

比利時兔毛色屬野生類型，被毛深紅帶黃褐色或紅褐色，整根毛的兩端深、中間較淺，質(zhì)地堅韌，緊貼體表。其頭、頸、背、體側、四肢外側毛纖維均與野兔毛纖維顏色相似，毛纖維的基部為淺灰色，中段色稍淡，毛尖顏色深，并夾雜有黑色槍毛。下頜、頸下、四肢內(nèi)側、腹部、尾之腹面毛色較淺。皮膚除腹部、四肢內(nèi)側、頜下為褐黃色外，其他部位為深灰色，毛色光亮。比利時兔毛色有天然光澤，被毛皮張大、皮板柔性和彈性好，備受毛皮市場青睞。

比利時毛色不僅可以作為容易識別的家兔品種特征，而且有特定的經(jīng)濟價值、社會需求和市場偏好。家兔毛色受多個基因控制，這些基因間呈現(xiàn)復雜的顯隱性和上位互作關系，生產(chǎn)實踐中比利時毛色家兔的遺傳背景比較復雜，很少有毛色純合的種群，利用常規(guī)育種方法進行毛色純化不僅費時費力，而且往往不夠徹底。大多數(shù)比利時毛色家兔種群中攜帶隱性白基因，后代常出現(xiàn)白色個體，在利用比利時毛色家兔品系與白兔品系雜交生產(chǎn)中，這一問題尤為突出。在家兔純繁和雜交生產(chǎn)中，由于我們無法控制家兔繁殖過程中的毛色基因分離和重組，因此要獲得毛色一致的后代，必須通過對毛色基因型的育種設計，事先選育出特定基因型的純合子親本種群。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決現(xiàn)有技術存在的問題，本發(fā)明提供了一種基于基因型選擇的比利時毛色家兔純化方法。本發(fā)明所述方法為：首先挑選出毛色表型為比利時毛色的家兔；隨后使用第一引物組、第二引物組和第三引物組，同時對ASIP基因、MC1R基因和TYR基因進行檢測，篩選出基因型為AA(對應ASIP基因)、EE(對應MC1R基因)和CC(對應TYR基因)的比利時毛色兔。

本發(fā)明所采用的技術方案為：

本發(fā)明中，使用到的基因包括ASIP基因、MC1R基因和TYR基因。

ASIP基因，即通常所說的Agouti基因，中文為“刺豚鼠毛色基因”或“鼠灰色基因”，其結構復雜，不是單一位點，而是一個含有許多等位基因的位點，由4個外顯子和3個內(nèi)含子組成。外顯子2、3和4為編碼序列，外顯子1為非編碼序列。ASIP基因編碼一種旁分泌信號分子，即Agouti信號蛋白(ASIP)，使毛囊黑色素細胞合成棕黑素。此外ASIP基因還編碼一種Agouti基因相關蛋白，與ASIP共同調(diào)節(jié)毛色。

黑素皮質(zhì)素受體1(melanocortin 1-receptor，MC1R)基因在控制黑色素形成過程中起重要作用，MC1R為G蛋白耦合的受體黑色素皮質(zhì)素受體家族之一，是其家族成員中最小的一個受體，編碼蛋白主要作用于黑色素細胞，與a-MSH(alpha melnocyte stimulatinghormone receptor)結合提高環(huán)腺苷酸水平，形成真黑色素。家兔不同的MC1R基因型對應不同的毛色。

ASIP和MC1R是哺乳動物體內(nèi)調(diào)控毛色的兩個重要候選基因，ASIP的表達會引起褐黑素的產(chǎn)生，MC1R的表達會引起真黑素的產(chǎn)生，通過調(diào)節(jié)真黑素和褐黑素的比例來影響毛色。

酪氨酸酶(TYR)基因位于常染色體上，正常的TYR基因控制的性狀是有色毛，當TYR基因中第1119位點的堿基由“C”突變?yōu)椤癆”時，為隱性白基因型。