[發明專利]一種荊半夏組織培養快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201910026232.7
• 申請日: 2019-01-11
• 公開（公告）號: CN109757373A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發明（設計）人: 張建;趙振軍;武彥芳;曹運梅
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 黃君軍

本發明提供了一種荊半夏組織培養快速繁殖方法，包括如下步驟：(1)培養基的配制；(2)外植體的選擇；(3)誘導獲得愈傷組織；(4)愈傷組織增殖培養；(5)愈傷組織分化培養；(6)加速培養；(7)壯苗培養；(8)煉苗移栽。本發明采用特制的培養基及通過對愈傷組織進行液體培養十天，體積和重量增大300％，愈傷組織質量較好；當固體培養基出現綠色芽點時，再次轉入液體培養基時，經過十天培養，愈傷組織分化，出現大量根系和芽點，體積和重量明顯增大；然后轉移至固體培養基上，根系繼續增長，芽點繼續發育，形成大量葉片，15d即可形成完整的半夏植株，繁殖系數達到20以上，生根率達95％以上，移栽成活率在99％以上。

技術領域

本發明涉及苗木無性繁殖技術領域，特別涉及一種荊半夏組織培養快速繁殖方法。

背景技術

半夏[Pinellia ternate(Thunb.)Breit.]屬天南星科半夏屬植物，以干燥塊莖入藥，是一種重要的中藥材，半夏塊莖含揮發油、煙堿、谷氨酸、谷甾醇等化學成分。具有降逆止吐、燥濕化痰、消痞散結等功能，多用于治療痰喘咳、惡心嘔吐、眩暈等。古之《神龍本草經》稱半夏為守田、水玉，其為多年生草本植物，多為夏秋兩季采挖，其塊莖成圓球形或扁圓形，喜沙性土壤，是一味應用廣泛、療效確切的大宗傳統中藥材。原荊州尤江陵、潛江盛產，且品質優良，俗稱“荊半夏”。因其品質優良、藥效特佳而成為半夏入藥首選。令人無奈的是，如今市場上供給的荊半夏越來越少，現時多用的半夏為“水半夏”，雖都有半夏之稱，“水半夏”在上世紀八十年代卻是屬于查處、沒收、罰款的藥材，藥性與荊半夏大不相同，藥價有天壤之別。為什么曾經的被查處的“水半夏”如今能替代半夏大行其道呢？由于半夏藥用和出口需求量大，造成野生資源日益枯竭難以滿足要求，價格持續上揚，居高不下。目前，雖有人工栽培種植荊半夏可以緩解市場壓力，但由于荊半夏生長要求陰濕環境，在災害性天氣較多的年份，會造成收獲量不足的情況，這對荊半夏的生產造成極大限制。另外，半夏連作種植易導致病毒侵染，種性退后，產量和品質下降。因此，考慮使用植物組培快繁技術進行荊半夏種苗生產并進行人工種植是解決荊半夏資源短缺的有效途徑。

對比文件1：申請號為“CN201410023655.0”，名稱為“一種半夏一步成苗的組織培養方法以及新的半夏培養基”公開了一種半夏一步成苗的組織培養方法，以6-BA和NAA激素組合，對株芽、塊莖、葉片和葉柄為外植體，進行一步成苗誘導，塊莖分化效率最高，每塊愈傷組織分化出12-14個小苗，成苗率95％。塊莖成苗天數35-40d，葉片和葉柄需要2-3個月。然而該案存在愈傷組織增殖速度慢、器官分化效率低等顯著不足的缺點。此外，該案在外植體選擇上存在較多限制因素，塊莖和株芽作為外植體存在消毒不徹底，污染率高的問題；且成苗時間過長，難以滿足市場的需求。

對比文件2：申請號為“CN200510062339.5”，名稱為“一種半夏脫毒組培快繁的方法”涉及一種半夏脫毒組培快繁的方法，以半夏未成熟的種子或成熟種子為外植體，經誘導培養、增殖培養、生根培養、移栽，獲得脫毒的組培苗、株芽以及小塊根，繁殖系數為5-10倍。然而該繁殖系數仍有待提高，且并未對增值系數、增值效果做數據說明。

因而，如何開發一種荊半夏的快速培養方法，且提高其增值效率以及分化效率，以滿足市場需求，成為亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術之缺陷，提供了一種荊半夏組織培養快速繁殖方法，采用本發明所述的培養方法得到的荊半夏愈傷組織繁殖系數達到20以上，叢生芽健壯，接種到愈傷組織分化培養基以及加速培養基后容易生根，生根率可達95％以上，移栽成活率在99％以上，愈傷組織增殖速度快、質量好，培養分化、成苗所需時間短，可在短短的15天內即可形成完整的半夏植株，保障荊半夏苗的增殖系數和種苗質量，實現規模化生產，滿足了生產上的需要。

本發明是這樣實現的：

本發明提供一種荊半夏組織培養快速繁殖方法，具體包括如下步驟：

步驟1、培養基的配制：