[發(fā)明專利]一種荊半夏組織培養(yǎng)快速繁殖方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910026232.7
• 申請日: 2019-01-11
• 公開（公告）號: CN109757373A
• 公開（公告）日: 2019-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張建;趙振軍;武彥芳;曹運(yùn)梅
• 申請（專利權(quán)）人: 長江大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢智嘉聯(lián)合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 42231
• 代理人: 黃君軍

本發(fā)明提供了一種荊半夏組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括如下步驟：(1)培養(yǎng)基的配制；(2)外植體的選擇；(3)誘導(dǎo)獲得愈傷組織；(4)愈傷組織增殖培養(yǎng)；(5)愈傷組織分化培養(yǎng)；(6)加速培養(yǎng)；(7)壯苗培養(yǎng)；(8)煉苗移栽。本發(fā)明采用特制的培養(yǎng)基及通過對愈傷組織進(jìn)行液體培養(yǎng)十天，體積和重量增大300％，愈傷組織質(zhì)量較好；當(dāng)固體培養(yǎng)基出現(xiàn)綠色芽點時，再次轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基時，經(jīng)過十天培養(yǎng)，愈傷組織分化，出現(xiàn)大量根系和芽點，體積和重量明顯增大；然后轉(zhuǎn)移至固體培養(yǎng)基上，根系繼續(xù)增長，芽點繼續(xù)發(fā)育，形成大量葉片，15d即可形成完整的半夏植株，繁殖系數(shù)達(dá)到20以上，生根率達(dá)95％以上，移栽成活率在99％以上。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及苗木無性繁殖技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種荊半夏組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)

半夏[Pinellia ternate(Thunb.)Breit.]屬天南星科半夏屬植物，以干燥塊莖入藥，是一種重要的中藥材，半夏塊莖含揮發(fā)油、煙堿、谷氨酸、谷甾醇等化學(xué)成分。具有降逆止吐、燥濕化痰、消痞散結(jié)等功能，多用于治療痰喘咳、惡心嘔吐、眩暈等。古之《神龍本草經(jīng)》稱半夏為守田、水玉，其為多年生草本植物，多為夏秋兩季采挖，其塊莖成圓球形或扁圓形，喜沙性土壤，是一味應(yīng)用廣泛、療效確切的大宗傳統(tǒng)中藥材。原荊州尤江陵、潛江盛產(chǎn)，且品質(zhì)優(yōu)良，俗稱“荊半夏”。因其品質(zhì)優(yōu)良、藥效特佳而成為半夏入藥首選。令人無奈的是，如今市場上供給的荊半夏越來越少，現(xiàn)時多用的半夏為“水半夏”，雖都有半夏之稱，“水半夏”在上世紀(jì)八十年代卻是屬于查處、沒收、罰款的藥材，藥性與荊半夏大不相同，藥價有天壤之別。為什么曾經(jīng)的被查處的“水半夏”如今能替代半夏大行其道呢？由于半夏藥用和出口需求量大，造成野生資源日益枯竭難以滿足要求，價格持續(xù)上揚(yáng)，居高不下。目前，雖有人工栽培種植荊半夏可以緩解市場壓力，但由于荊半夏生長要求陰濕環(huán)境，在災(zāi)害性天氣較多的年份，會造成收獲量不足的情況，這對荊半夏的生產(chǎn)造成極大限制。另外，半夏連作種植易導(dǎo)致病毒侵染，種性退后，產(chǎn)量和品質(zhì)下降。因此，考慮使用植物組培快繁技術(shù)進(jìn)行荊半夏種苗生產(chǎn)并進(jìn)行人工種植是解決荊半夏資源短缺的有效途徑。

對比文件1：申請?zhí)枮椤癈N201410023655.0”，名稱為“一種半夏一步成苗的組織培養(yǎng)方法以及新的半夏培養(yǎng)基”公開了一種半夏一步成苗的組織培養(yǎng)方法，以6-BA和NAA激素組合，對株芽、塊莖、葉片和葉柄為外植體，進(jìn)行一步成苗誘導(dǎo)，塊莖分化效率最高，每塊愈傷組織分化出12-14個小苗，成苗率95％。塊莖成苗天數(shù)35-40d，葉片和葉柄需要2-3個月。然而該案存在愈傷組織增殖速度慢、器官分化效率低等顯著不足的缺點。此外，該案在外植體選擇上存在較多限制因素，塊莖和株芽作為外植體存在消毒不徹底，污染率高的問題；且成苗時間過長，難以滿足市場的需求。

對比文件2：申請?zhí)枮椤癈N200510062339.5”，名稱為“一種半夏脫毒組培快繁的方法”涉及一種半夏脫毒組培快繁的方法，以半夏未成熟的種子或成熟種子為外植體，經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、移栽，獲得脫毒的組培苗、株芽以及小塊根，繁殖系數(shù)為5-10倍。然而該繁殖系數(shù)仍有待提高，且并未對增值系數(shù)、增值效果做數(shù)據(jù)說明。

因而，如何開發(fā)一種荊半夏的快速培養(yǎng)方法，且提高其增值效率以及分化效率，以滿足市場需求，成為亟待解決的技術(shù)問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，提供了一種荊半夏組織培養(yǎng)快速繁殖方法，采用本發(fā)明所述的培養(yǎng)方法得到的荊半夏愈傷組織繁殖系數(shù)達(dá)到20以上，叢生芽健壯，接種到愈傷組織分化培養(yǎng)基以及加速培養(yǎng)基后容易生根，生根率可達(dá)95％以上，移栽成活率在99％以上，愈傷組織增殖速度快、質(zhì)量好，培養(yǎng)分化、成苗所需時間短，可在短短的15天內(nèi)即可形成完整的半夏植株，保障荊半夏苗的增殖系數(shù)和種苗質(zhì)量，實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，滿足了生產(chǎn)上的需要。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

本發(fā)明提供一種荊半夏組織培養(yǎng)快速繁殖方法，具體包括如下步驟：

步驟1、培養(yǎng)基的配制：