[發(fā)明專利]一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子的免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910021988.2 | 申請日： | 2019-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN109406602B | 公開（公告）日： | 2020-08-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 劉青;董慧;劉會;顏芹;譚召靈;董云會 | 申請（專利權(quán)）人： | 山東理工大學(xué) |
| 主分類號： | G01N27/327 | 分類號： | G01N27/327;G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 255086 山東省淄*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 基于 海膽 空心 銀鉑鈀三 金屬 納米 粒子 免疫 傳感器 制備 方法 應(yīng)用 | ||
本發(fā)明屬于新型納米材料、免疫分析和生物傳感技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子的免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用，以及由該方法構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器在檢測癌胚抗原中的應(yīng)用，具有檢測范圍寬、檢測下限低、靈敏度高、操作簡單、檢測速度快等優(yōu)點(diǎn)，并且具有良好的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和選擇性，構(gòu)建此電化學(xué)免疫傳感器的研究對癌胚抗原的檢測具有十分重要的意義。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于新型納米材料、免疫分析和生物傳感技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子的免疫傳感器的制備方法及應(yīng)用，以及由該方法構(gòu)建的電化學(xué)免疫傳感器在檢測癌胚抗原中的應(yīng)用，屬于新型功能納米材料、免疫分析以及生物傳感檢測技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
癌胚抗原是常見的一種腫瘤標(biāo)志物，存在于胃腸道、呼吸道、泌尿道、乳腺、卵巢等。作為最常見的腫瘤標(biāo)識物，在癌細(xì)胞與癌細(xì)胞及其基質(zhì)膠原之間進(jìn)行粘附反應(yīng)，在腫瘤的發(fā)展和各種癌癥復(fù)發(fā)的情況下起著非常大的作用及意義。正常人血清中癌胚抗原濃度小于2.5 μg/mL，但吸煙、妊娠期和心血管疾病、糖尿病、非特異性結(jié)腸炎等疾病中，15％到53％的病人血清癌胚抗原含量也會升高。所以血清中癌胚抗原的濃度可以作為良性與惡性腫瘤的診斷根據(jù)。
電化學(xué)免疫傳感器是一種將電化學(xué)分析方法與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合而發(fā)展起來的具有快速、靈敏、選擇性高、成本低廉、操作簡便等特點(diǎn)的生物傳感器，是基于抗原與抗體特異性反應(yīng)前后引起電流、電容、電位、電導(dǎo)、交流阻抗等電化學(xué)信號的變化來實(shí)現(xiàn)對它們對應(yīng)濃度的測定。
本發(fā)明利用層層自組裝技術(shù)，以多碳納米管/殼聚糖為基底，以海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子作為癌胚抗原檢測抗體的標(biāo)記物，制備了一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬的免疫傳感器，實(shí)現(xiàn)了對癌胚抗原的定量檢測，具有檢測范圍寬、檢測下限低、靈敏度高、操作簡單、檢測速度快等優(yōu)點(diǎn)，并且具有良好的重現(xiàn)性、穩(wěn)定性和選擇性，構(gòu)建此電化學(xué)免疫傳感器的研究對癌胚抗原的檢測具有十分重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子的免疫傳感器，所述電化學(xué)免疫傳感器包括：工作電極、對電極和參比電極，所述工作電極為玻碳電極，其表面依次修飾多碳納米管/殼聚糖、癌胚抗原捕獲抗體、牛血清蛋白、癌胚抗原、海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子標(biāo)記的癌胚抗原檢測抗體，所述對電極為鉑絲電極，所述參比電極為飽和甘汞電極。
本發(fā)明的目的是提供一種海膽狀金銀鈀三金屬功能性納米材料，構(gòu)建了一種快速超靈敏的夾心型電化學(xué)免疫傳感器。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
1. 一種基于海膽狀空心銀鉑鈀三金屬納米粒子的免疫傳感器的制備方法，其特征包括以下幾個(gè)步驟：
（1）將直徑為3.0 ~ 5.0 mm的玻碳電極用氧化鋁拋光粉拋光成鏡面，在無水乙醇中超聲清洗干凈；
（2）取6.0 μL、0.5 ~ 4.0 mg/mL的多壁碳納米管/殼聚糖分散液滴加到電極表面，室溫下晾干，用超純水沖洗電極表面，晾干；
（3）繼續(xù)將6.0 μL、5.0 ~ 15.0 μg/mL的癌胚抗原捕獲抗體滴加到電極表面，4 ℃冰箱中干燥；
（4）繼續(xù)將3.0 μL、1.0 ~ 2.0 wt%的BSA溶液滴加到電極表面，用以封閉電極表面上非特異性活性位點(diǎn)，pH = 6.98磷酸鹽緩沖液沖洗電極表面，4 ℃冰箱中晾干；
（5）滴加6.0 μL、0.000001 ~ 1 ng/mL的一系列不同濃度的癌胚抗原溶液，pH =6.98磷酸鹽緩沖液沖洗電極表面，4 ℃冰箱中晾干；
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于山東理工大學(xué)，未經(jīng)山東理工大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201910021988.2/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
