[發明專利]一種葉酸-蒜酶綴合物及其制備方法

在審

• 申請號: 201910020101.8
• 申請日: 2019-01-09
• 公開（公告）號: CN109432435A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 李新霞;關明;朱麗;羅春霞;李心雨
• 申請（專利權）人: 新疆醫科大學
• 主分類號: A61K47/54
• 分類號: A61K47/54;A61K38/51;A61P35/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 代芳

本發明屬于有機合成領域。本發明提供了一種葉酸?蒜酶綴合物和兩種制備所述葉酸?蒜酶綴合物的方法。本發明以葉酸作為蒜酶載體，分別采用碳二亞胺活化法、碳二亞胺和N?羥基琥珀酰亞胺聯用活化法來合成一種新的葉酸類綴合物——葉酸?蒜酶綴合物。根據實施例結果可知，本發明能夠成功制備葉酸?蒜酶綴合物，且所得葉酸?蒜酶綴合物的靶向性良好，能夠與腫瘤細胞結合；所述葉酸?蒜酶綴合物在體外條件下對靶細胞具有良好的特異性識別功能。

技術領域

本發明涉及有機合成技術領域，尤其涉及一種葉酸-蒜酶綴合物及其制備方法。

背景技術

大蒜是多年生百合科蔥屬植物蒜(Allium sativum L.)的地下鱗莖，具有悠久的醫藥和食品歷史。大蒜的化學成分主要包括含硫有機化合物和皂苷類，含硫有機化合物是大蒜重要的活性物質，主要是蒜氨酸和大蒜辣素。蒜酶(alliinase)是大蒜中一種二聚體糖蛋白，可催化合成具有多種生物活性的大蒜辣素。

葉酸受體是一種腫瘤相關蛋白，它可以通過內吞攝入葉酸以及葉酸衍生物。葉酸受體在超過90％的卵巢癌、腎癌、肺癌和乳腺癌以及其他婦科癌癥中均高度表達，而在正常組織中的表達高度保守。葉酸的缺乏可以導致乳腺癌、卵巢癌等人體腫瘤的發生。葉酸受體(folate receptors，FR)是目前研究較熱的靶點之一，具有較高的組織特異性，能與葉酸特異性結合。葉酸是一種配體，能夠靶向共價結合的生物活性物質。利用葉酸作為藥物載體與藥物結合的靶向給藥系統正倍受關注。研究發現，葉酸受體主要是識別葉酸中的蝶酸部分，谷氨酸殘基對受體識別的影響不大，所以載體部分可以看做是葉酸中的蝶酸，利用谷氨酸與藥物鍵合形成葉酸-藥物綴合物。

目前，現有技術中以葉酸作為載體的綴合物的種類還很少。

發明內容

本發明的目的在于提供一種葉酸-蒜酶綴合物，拓展葉酸綴合物的種類。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種葉酸-蒜酶綴合物，其結構式如式Ⅰ所示：

本發明提供了一種所述葉酸-蒜酶綴合物的制備方法，包含如下步驟：

(1)將葉酸溶于磷酸鹽緩沖液中得到葉酸溶液；

(2)將所述葉酸溶液和碳二亞胺鹽酸鹽混合進行加成反應，得到加成產物體系；

(3)將蒜酶溶于磷酸鹽緩沖液中得到蒜酶溶液；

(4)將所述加成產物體系和所述蒜酶溶液混合進行酰胺化反應，生成葉酸-蒜酶綴合物；

步驟(1)～(2)和步驟(3)無先后順序限制。

優選的，所述步驟(1)和步驟(3)中的磷酸鹽緩沖液的pH值獨立地為7～8；

所述步驟(1)中葉酸的質量和磷酸鹽緩沖液的體積之比為(20～40)mg:(1～5)mL；

所述步驟(3)中蒜酶的質量和磷酸鹽緩沖液的體積之比為(140～160)mg:(8～12)mL；

所述步驟(1)中葉酸和步驟(3)中蒜酶的質量比為(20～40):(140～160)。

優選的，所述步驟(2)中碳二亞胺鹽酸鹽和步驟(1)中葉酸的質量比為(70～80):(20～40)；

所述加成反應在室溫下進行，時間為20～40min。

優選的，所述步驟(4)中酰胺化反應在室溫下進行，時間為1～3h。

本發明提供了另外一種所述葉酸-蒜酶綴合物的制備方法，包含如下步驟：

(1)將葉酸溶于磷酸鹽緩沖液中得到葉酸溶液；