[發明專利]一種從大米多肽中制備抗氧化三肽的方法及應用

在審

• 申請號: 201910011518.8
• 申請日: 2019-01-07
• 公開（公告）號: CN109575106A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 梁明;尹西拳;任嬌艷
• 申請（專利權）人: 無限極（中國）有限公司
• 主分類號: C07K5/083
• 分類號: C07K5/083;C07K1/16;C12P21/06;A61K38/07;A61P39/06;A23L33/18
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿;趙青朵

本發明涉及多肽技術領域，尤其涉及一種從大米多肽中制備抗氧化三肽的方法及應用。本發明提供的從大米多肽中制備的抗氧化肽含有Ser?Ile?Arg、Ser?Leu?Arg、Val?Pro?Arg三種三肽，該抗氧化三肽的制備依次經過酶解、纖維素玻璃柱純化和葡聚糖凝膠柱純化，該抗氧化三肽能夠耐受胃腸消化，自由基吸收能力(ORAC)較強，說明其具有良好的抗氧化活性。本發明所述多肽的制備方法簡單，不采用有害試劑，所得產品更安全。

技術領域

本發明涉及多肽技術領域，尤其涉及一種從大米多肽中制備抗氧化三肽的方法及應用。

背景技術

大米是我國第一大糧食品種，年產量約2億噸，占全球糧食總種植面積的30％左右。大米蛋白以其較高的生物利用率、合理的氨基酸組成、特有的低敏性等特點被認為是優質蛋白質，與牛乳、豆類蛋白相比更適合于飼料、嬰幼兒、老年人及特殊人群。但長期以來，我國大米加工僅處于滿足人們口糧需求的初級加工狀態，稻米加工產品結構單一，深加工率僅20％，高附加值產品少。

多肽是介于大分子蛋白質和氨基酸之間的一段最具活性、最易吸收、生理功能效價高的一種營養物質。在一定條件下，蛋白經酶解可以得到多種生物活性肽，它們大多以非活性狀態存在于蛋白質長鏈中，一旦經過酶解成為適當長度的肽，就可表現出調節機體免疫力的生理活性，并保持低過敏性。在已獲得的生物肽中，動物源活性肽占大多數，而植物源活性肽逐漸成為研究的新亮點。

在大米活性肽經口服在體內發揮生理活性之前，會受到一系列阻礙，如胃中的低酸環境和胃蛋白酶；腸道中堿性環境和胰蛋白酶、肽酶以及小腸對其吸收的屏障作用等。這些因素都會影響大米多肽的吸收從而影響其在生物體內的生理活性，大米多肽進入血液循環到達靶點是其發揮功能的前提條件。

目前已有發明專利設計酶解大米蛋白制備大米多肽的技術，但均從不同方面體現出一定的不足：例如，不能在胃腸道中保持穩定，在吸收前結構被破壞，喪失活性；在制備過程中特別是干燥過程中，被破壞活性受到影響；提取過程中的提取試劑對產品安全性存在不利影響。

發明內容

有鑒于此，本發明要解決的技術問題在于提供一種從大米多肽中制備抗氧化三肽的方法及應用，該多肽能夠耐受胃腸消化，且具有良好的抗氧化活性。

本發明提供了含有三肽Ser-Ile-Arg、Ser-Leu-Arg和/或Val-Pro-Arg的大米多肽。

其中，Ser為絲氨酸的氨基酸相應殘基，Ile為異亮氨酸的氨基酸相應殘基，Arg為精氨酸的氨基酸相應殘基，Leu為亮氨酸的氨基酸相應殘基，Val為纈氨酸的氨基酸相應殘基，Pro為脯氨酸的氨基酸相應殘基。一些具體實施例中，本發明提供的大米多肽含有三肽Ser-Ile-Arg、Ser-Leu-Arg和Val-Pro-Arg。

本發明所述大米多肽的制備方法，包括：

45～55℃，pH值為5.5～6.5，大米蛋白以風味蛋白酶酶解3～5h，制得多肽A；

35～40℃，pH值為1～2，所述多肽A以胃蛋白酶酶解80～100min，制得多肽B；

35～40℃，pH值為7～8，所述多肽B以胰蛋白酶酶解1～3h，制得所述大米多肽。

本發明中，所述風味蛋白酶又稱為風味酶，是由米曲霉菌株發酵提純、復配而成的酶制劑。一些具體實施例中，所述風味蛋白酶為市售產品。

在風味蛋白酶酶解的步驟中，所述大米蛋白的濃度為100g/mL，風味蛋白酶的質量分數為0.75％。一些實施例中，風味蛋白酶酶解的條件為50℃，pH值為6.0，4h。風味蛋白酶酶解后，沸水浴滅酶。所得酶解液8000rpm離心20min，上清液經濃縮、凍干獲得多肽A。