[發明專利]一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法

在審

• 申請號: 201910007389.5
• 申請日: 2019-01-04
• 公開（公告）號: CN109507353A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 錢可;姚大年;吳豪;檀華榮;鄭文寅;侯丞志;張文明;黃建華
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，包括黑小麥麩皮中花色苷的提取、標準曲線的繪制和高效液相測定。高效液相測定時的色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相：A為乙腈，B為0.2％甲酸水溶液；檢測波長：525nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL，進行梯度洗脫。比較樣品和標準品的高效液相色譜圖，依組份保留時間進行定性分析，與標準品的高效液相色譜圖中相同時間的峰面積與標準曲線比較進行定量分析。本發明方法簡單，測定結果準確、靈敏、重現性好。線性試驗結果表明，在一定濃度范圍內，花色苷標準曲線呈極顯著正相關，近似于線性關系(R²≥0.99)。

技術領域

本發明涉及一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，屬于化學分析檢測技術領域。

背景技術

黑粒小麥因其種皮及糊粉層富含天然花色苷類化合物而呈現黑色，所含有的天然花色苷在促進人類身體健康和預防心血管疾病方面有重要作用，是珍貴的種質資源。

花青素為彩粒小麥中的主要黃酮類物質，在自然狀態下常與各種糖結合形成糖苷，稱為花色苷?；ㄉ兆鳛橐环N天然色素，具有一定的營養和藥理作用，在食品、化妝品、醫藥、保健等方面有著巨大的應用潛力。大量研究結果表明，花色苷具有抗氧化，抗癌，抗炎癥，預防心血管疾病等多種生理功能。然而，由于花色苷類色素的成分極其復雜多樣，目前，這類色素的質量標準依舊采用分光光度計測定色素色價的方法，已經無法滿足對色素成分定量分析的要求。

發明內容

本發明的目的在于提供一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供的技術方案是：一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，包括下列步驟：

步驟1、黑小麥麩皮中花色苷的提取

將黑小麥麩皮加入酸化甲醇提取劑中，超聲提取15-25min，然后對提取液進行離心，得到上清液；

步驟2、標準曲線的繪制

S1、將矢車菊-3,0-葡萄糖苷作為標準對照品，加入至體積分數為70％的甲醇溶液中溶解，定容后即得標準對照品儲備液，放入-20℃冰箱中冷藏，備用；

S2、然后將所述標準對照品儲備液稀釋不同倍數，用高效液相法，在波長525nm下測定其吸收峰，以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線；

步驟3、高效液相測定

色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相：A為乙腈，B為體積分數為0.2％的甲酸水溶液；檢測波長：525nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL，進行梯度洗脫；將上清液用 0.22μm濾膜過濾，然后注入高效液相色譜儀，比較樣品和標準品的高效液相色譜圖，依組份保留時間進行定性分析，與標準品的高效液相色譜圖中相同時間的峰面積與標準曲線比較進行定量分析；

按公式(1)計算黑小麥麩皮中矢車菊-3,0-葡萄糖苷含量；

公式(1)中，ω為花色苷質量分數，單位為mg/g；p為測定的花色苷濃度，單位為mg/mL； V為樣品提取液的體積，單位為mL；m為樣品總質量，單位為g。

優選的技術方案為：所述酸化甲醇提取液的體積分數為70％，由甲醇、鹽酸和水按照體積比70：0.5：29.5混合后制得；所述鹽酸的體積分數為36％。

優選的技術方案為：所述梯度洗脫方法如下表：