[發明專利]一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法

在審

• 申請號: 201910007389.5
• 申請日: 2019-01-04
• 公開（公告）號: CN109507353A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 錢可;姚大年;吳豪;檀華榮;鄭文寅;侯丞志;張文明;黃建華
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

1.一種黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1、黑小麥麩皮中花色苷的提取

將黑小麥麩皮加入酸化甲醇提取劑中，超聲提取15-25min，然后對提取液進行離心，得到上清液；

步驟2、標準曲線的繪制

S1、將矢車菊-3,0-葡萄糖苷作為標準對照品，加入至體積分數為70％的甲醇溶液中溶解，定容后即得標準對照品儲備液，放入-20℃冰箱中冷藏，備用；

S2、然后將所述標準對照品儲備液稀釋不同倍數，用高效液相法，在波長525nm下測定其吸收峰，以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線；

步驟3、高效液相測定

色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相：A為乙腈，B為體積分數為0.2％的甲酸水溶液；檢測波長：525nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL，進行梯度洗脫；將上清液用0.22μm濾膜過濾，然后注入高效液相色譜儀，比較樣品和標準品的高效液相色譜圖，依組份保留時間進行定性分析，與標準品的高效液相色譜圖中相同時間的峰面積與標準曲線比較進行定量分析；

按公式(1)計算黑小麥麩皮中矢車菊-3,0-葡萄糖苷含量；

公式(1)中，ω為花色苷質量分數，單位為mg/g；p為測定的花色苷濃度，單位為mg/mL；V為樣品提取液的體積，單位為mL；m為樣品總質量，單位為g。

2.根據權利要求1所述的黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，其特征在于：所述酸化甲醇提取液的體積分數為70％，由甲醇、鹽酸和水按照體積比70∶0.5∶29.5混合后制得；所述鹽酸的體積分數為36％。

3.根據權利要求1所述的黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，其特征在于：所述梯度洗脫方法如下表：

。

4.根據權利要求1所述的黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，其特征在于：步驟1中，將0.5克黑小麥麩皮樣品，加入2mL體積分數為70％的酸化甲醇提取劑中，60℃條件下超聲提取20min，5000r/min離心15min，重復提取3次，合并后得到上清液，放入-20℃冰箱中冷藏，備用。

5.根據權利要求1所述的黑小麥麩皮中花色苷的高效液相色譜檢測方法，其特征在于：所述色譜柱為十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的C18色譜柱。