[發明專利]一種Inb血型抗原芯片及其在紅細胞意外抗體檢測中的應用在審
| 申請號: | 201910003170.8 | 申請日: | 2019-01-03 |
| 公開(公告)號: | CN109725145A | 公開(公告)日: | 2019-05-07 |
| 發明(設計)人: | 于曉波;汪德清;楊璐 | 申請(專利權)人: | 北京蛋白質組研究中心 |
| 主分類號: | G01N33/53 | 分類號: | G01N33/53;G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京領科知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11690 | 代理人: | 張丹 |
| 地址: | 102206 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 紅細胞 血型抗原 抗體檢測 芯片 標記物 抗原 包被 抗體 高通量檢測 檢測樣品 結果判讀 特異性強 稀有血型 信號檢測 靈敏度 檢測 二抗 應用 核對 細胞 | ||
1.一種血型抗原芯片,包括純化血型抗原和載體,所述的純化血型抗原包被至所述的載體上;所述的載體為微球,所述的微球選自二氧化硅微球、聚苯乙烯微球、磁性微球和生物大分子聚合物微球中的一種或兩種以上的組合。
2.根據權利要求1所述的血型抗原芯片,其特征在于,所述純化血型抗原為Inb。
3.根據權利要求1所述的血型抗原芯片,其特征在于,所述的純化血型抗原包被至載體的量為1-200μg/1.25×107個微球。
4.一種權利要求1-3任一所述的血型抗原芯片的制備方法,包括如下步驟:
(1)微球的預處理:將微球超聲重懸;
(2)微球的活化:將微球依次加入N-羥基硫代琥珀酰亞胺、碳二亞胺活化;
(3)向微球溶液中加入純化血型抗原進行偶聯,所述的純化血型抗原能夠結合紅細胞意外抗體。
5.一種權利要求1-3任一所述的血型抗原芯片在如下用途中的應用:(1)紅細胞意外抗體的篩查及鑒定;(2)紅細胞意外抗體的定量檢測;(3)輸血配型。
6.一種用權利要求1-3任一所述的血型抗原芯片進行血型抗體的鑒定或檢測方法,包括:
(1)將純化血型抗原包被至載體,所述的純化血型抗原能夠結合紅細胞意外抗體;
(2)使檢測樣品與包被至載體的抗原孵育;
(3)加入標記有標記物的二抗;
(4)針對標記物進行信號檢測。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述的檢測樣品為全血、血清、血漿或抗體,所述檢測樣品稀釋后再與包被至載體的抗原接觸,稀釋倍數為25-200倍。
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述步驟(2)中檢測樣品與包被至載體的抗原孵育的時間為15-60min。
9.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述的標記有標記物的二抗選自標記有熒光素或酶的蛋白或抗體及其偶聯物;所述蛋白或抗體及其偶聯物選自親和素、鏈霉親和素、地高辛抗體、組氨酸抗體、含Ni親和分子、熒光分子抗體;所述的熒光素選自花青素Cy系列熒光素、Alexa Fluor系列熒光素或異硫氰酸熒光素;所述的酶為堿性磷酸酶或過氧化物酶;所述二抗的加入濃度為1-8ug/ml。
10.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述的信號檢測包括熒光法檢測、顯色法檢測、電化學檢測、力學檢測。
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