[發明專利]一種用于檢測苯丙酮尿癥相關致病基因的試劑盒及其專用捕獲探針組

有效

• 申請號: 201910001308.0
• 申請日: 2019-01-02
• 公開（公告）號: CN111394446B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發明（設計）人: 伍建;姬曉雯;郜玉杰
• 申請（專利權）人: 北京邁基諾基因科技股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

本發明公開了一種用于檢測苯丙酮尿癥相關致病基因的試劑盒及其專用捕獲探針組。本發明提供的捕獲探針由序列表中序列1至序列108所示的探針組成。本發明的試劑盒能同時檢測PAH、PTS、GCH1、QDPR、PCBD1、SPR這6個苯丙酮尿癥的致病基因，對于多種點突變類型的苯丙酮尿癥均可檢測，且可檢測PAH、PTS、GCH1、QDPR、PCBD1、SPR基因的全長，有利于新的致病突變的發現，為苯丙酮尿癥的遺傳學基礎提供新的發現手段。

技術領域

本發明屬于基因工程、分子遺傳學及基因檢測領域，具體涉及一種用于檢測苯丙酮尿癥相關致病基因的試劑盒及其專用捕獲探針組。

背景技術

苯丙酮尿癥(PKU)是一種常見的氨基酸代謝病，是由于苯丙氨酸(PA)代謝途徑中的酶缺陷，使得苯丙氨酸不能轉變成為酪氨酸，導致苯丙氨酸及其酮酸蓄積，并從尿中大量排出。本病在遺傳性氨基酸代謝缺陷疾病中比較常見，其遺傳方式為常染色體隱性遺傳。臨床表現不均一，主要臨床特征為智力低下、精神神經癥狀、濕疹、皮膚抓痕征及色素脫失和鼠氣味等、腦電圖異常。如果能得到早期診斷和早期治療，則前述臨床表現可不發生，智力正常，腦電圖異常也可得到恢復。研究表明苯丙酮尿癥的主要致病基因有PAH、PTS、GCH1、QDPR、PCBD1、SPR。PKU分為兩種類型：經典的PKU和BH4缺乏性PKU，其中經典PKU占99％，是由于染色體基因突變導致肝臟中PAH缺陷而引起的苯丙氨酸代謝障礙所致。BH4缺乏性PKU是四氫生物蝶呤合成或代謝途徑中某種酶的先天性缺陷導致一些芳香族氨基酸(苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸及精氨酸)代謝障礙，影響腦內神經遞質合成，從而導致嚴重的神經系統損害癥狀體征和智能障礙。包括較常見的6-丙酮酰四氫蝶呤合成酶缺乏癥(PTPS)、二氫蝶啶還原酶缺乏癥(DHPR)、尿苷三磷酸環水解酶缺乏癥(GTPCH)、蝶呤-4α-二甲醇氨脫水酶缺乏癥(PCD)及墨蝶呤還原酶缺乏癥(SR)，分別由PTS、QDPR、GCH1、PCBD1及SPR基因突變致病。

PKU發病率有種族和地區差異，白人發病率較高，黑人和黃種人較低。發病率在歐洲約為1/10000，德國約為1/7000，愛爾蘭約為1/4400，日本約為1/120000，我國的發病率約為1/11188，其中北方地區發病高于南方，并且西北地區發病率明顯高于國內平均水平，這可能與西北地區獨特的地理位置構成有關。而且當地的PKU篩查覆蓋率和治療率均落后于發達城市，大部分患兒得不到及時的治療，嚴重影響了人口的素質，增加了嬰兒的死亡率，而且給家庭和社會帶來了巨大的損失。因此PKU的早期診斷、早期治療，有效預防患兒的出生，對于控制PKU發生和發展顯得尤為重要。

目前苯丙酮尿癥常規的臨床診斷方法主要有血苯丙氨酸測定、尿液蝶呤譜分析、血紅細胞二氫生物喋啶還原酶活性測定、頭顱核磁共振檢查等，這些傳統的方法不僅不能對患者進行早期診斷，而且對于明確鑒別雜合子和正常個體有一定的困難。由于苯丙酮尿癥的致病基因都在肝臟和腎臟中表達，基因診斷成為早期診斷的最有效手段，市場上已經有的檢測方法有：單連多態性PCR檢測、等位基因特異性擴增、短串聯重復序列及高壓液相色譜定量等，這也為PKU的早期診斷提供檢驗科學依據和基礎。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種用于捕獲苯丙酮尿癥相關基因的探針組。

本發明提供的用于捕獲苯丙酮尿癥相關基因的探針組由序列表中序列1至序列108所示的探針組成。

上述探針組中，所述每條探針均標記生物素，具體的，所述每條探針的5’端均標記生物素。