[發明專利]一種從紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法

在審

• 申請號: 201910001084.3
• 申請日: 2019-01-02
• 公開（公告）號: CN111393390A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 楊正明;羅國春
• 申請（專利權）人: 貴州羅貝羅生物科技有限公司
• 主分類號: C07D305/14
• 分類號: C07D305/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種從紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法，其步驟在于：1)、原材料的準備；2)、預處理；3)、有機溶劑粗提；4)、細粉的處理；5)、初級萃取；6)、C18固相萃取；7)、重結晶；本發明提供了一種操作簡單、成本低、重復性好、產品純度高的高效分離純化紫杉醇的方法；本發明以超聲輔助酶解為浸提手段，所用溶劑量較傳統方法大大降低，且提取效率高，酶解過程在弱酸存在下進行，有效減少了對雜質的浸提量，為后續處理提供了方便，簡單快速的柱層析過程能夠迅速除去脂溶性雜質，減少純化過程中有機溶劑的用量，弱堿性樹脂和強堿性樹脂的聯合使用，可快速、高效分離出紫杉醇及性質相近的雜質。

技術領域

本發明涉及紫杉醇提取領域，具體涉及一種從紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法。

背景技術

紅豆杉(俗稱紫杉，yew)植物分類歸于裸子植物亞門(Gymnospcrloe)，在我國醫學中早有記載：《本草綱目》就記有紅豆杉治療霍亂、傷寒、排毒等療效。1971年美國化學家Wani等從產于北美的短葉紅豆杉(T.brevifolia) 樹皮中分離出高抗癌活性紫杉烷二萜化合物紫杉醇，發現紫杉醇具有獨特的抗腫瘤作用，它能與微管蛋白質結合，形成穩定的穩管束，并使被解聚，將癌細胞停止在G2晚期或M期，抑制細胞復制，阻止癌細胞Z增殖。這一奇特的功效引起了NCI的高度重視，促進了臨床試驗研究。紫杉醇臨床研究始于1982 年，到1989年完成了I、II期的臨床試驗，1990年進行III期臨床試驗。 1992年12月29日美國國家食品與藥物管理局(FDA)正式批準其作為晚期卵巢癌、肺癌、子宮癌等抗癌藥物上市，紫杉醇是紅豆杉中主要活性成分，是萜類環狀結構的天然次生代謝衍生物，因其含量低、結構類似物較多、純度要求高、分離過程中易轉化等因素，給提取、分離和測定帶來了較大的困難，如何以低成本、簡單的工藝提取紫杉醇，將紫杉醇與其類似物分離(如與類似物三尖杉寧堿的分離)，獲得純度較高的紫杉醇產品，并對其進行精確的測定就成為研究的重點

常用的提取方法有：甲醇提取-有機溶劑萃取法、乙醇提取-有機溶劑萃取法等。萃取又可分為初級萃取和次級萃取，在這兩級萃取過程中，溶劑的選擇具有重要影響。常用的純化方法有：正相柱色譜法和反相色譜法主要包括常壓和低壓柱層析、干柱層析、制備性HPLC等法，以及一些較先進的分離手段如HSCCC(高速逆流色譜)等

紫杉醇作為一種生物大分子物質，受溫度、有機溶劑、酸、堿等環境條件的影響，易降解或異構生成其它紫杉烷類物質。如紫杉醇在強酸性或弱堿性環境條件下會降解為巴卡亭III或發生表位異構生成7-表紫杉醇；溫度較高時也會發生降解反應，生成相應的小分子物質

在初級萃取過程中采用超聲技術，進行超聲震蕩，以促進原料中物質的溶解，萃取過程所需的時間大為縮短。如果用紅豆杉植物體的枝葉作為紫杉醇的來源，由于枝葉特別是葉片中含有許多色素和蠟質，無疑將大大增加紫杉醇提取分離的難度。

由于用來提取紫杉醇的天然紅豆杉資源有限，且天然紅豆杉屬于國家珍惜保護植物，因而天然紫杉醇原料藥的生產和供應受到限制，遠遠不能滿足紫杉醇的臨床應用，現在人們大規模種植紅豆杉，從中提取紫杉醇等物質，以滿足臨床需要。但因紅豆杉種植生產周期長，生產成本較高，傳統提取方法效率低，資源浪費嚴重，因而尋找一種從紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法具有非常重要的意義。

目前有關紫杉醇類物質的提取方法，大多采用有機溶劑對紅豆杉原料多次浸提，浸提液回收后再用有機溶劑萃取，再經層析分離后結晶得到紫杉醇。這些方法存在最大問題是提取收率低，設備昂貴，并且造成了巨大的資源浪費，提高了生產成本，存在較大環保問題。

發明內容

發明目的：本發明所解決的技術問題在于提供一種有效解決了提取收率低、設備昂貴的問題，且環境友好，所得產品純度大于90％的紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法。

技術方案：一種從紅豆杉中高效提取紫杉醇的方法，其步驟在于：1)、原材料的準備；2)、預處理；3)、有機溶劑粗提；4)、細粉的處理；5)、初級萃取； 6)、C18固相萃取；7)、重結晶；