[發(fā)明專利]活體外誘導(dǎo)成體干細(xì)胞增殖及分化

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880095376.1
• 申請(qǐng)日: 2018-09-19
• 公開（公告）號(hào): CN112912492A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林希龍;林羿秀;張欽次
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 林希龍;林羿秀;張欽次
• 主分類號(hào): C12N5/074
• 分類號(hào): C12N5/074;C12N5/0789;C12N5/0797;C12N15/113;A61K38/18;A61K38/20;A61K35/12;A61K35/30;A61K35/28;A61K35/36;A61P25/28;A61P25/16;A61P25/00;A61P9
• 代理公司: 中國(guó)商標(biāo)專利事務(wù)所有限公司 11234
• 代理人: 曾海艷

本發(fā)明大體上是關(guān)于一種用于誘導(dǎo)成體干細(xì)胞(ASC)活體外增殖及/或分化的組合物及其使用方法，其使用miR?302類pre?miRNA、shRNA及/或siRNA，其皆在5'?末端中含有5'?UAAGUGCUUC CAUGUUU?3'的共用序列，且進(jìn)一步結(jié)合使用一些傷口愈合相關(guān)定義因子，包括但不限于堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(FGF?2)、白血病抑制因子(LIF)、似胰島素生長(zhǎng)因子(IGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血小板衍生的生長(zhǎng)因子(PDGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、轉(zhuǎn)型生長(zhǎng)因子(TGF)、腫瘤壞死因子(TNF)、干細(xì)胞因子(SCF)、同源盒蛋白質(zhì)(HOX)、Notch、GSK、Wnt/β?連環(huán)蛋白信號(hào)、介白素及/或骨成形性蛋白質(zhì)(BMP)。本發(fā)明的原理與近年來在活體內(nèi)皮膚傷口愈合模型中發(fā)現(xiàn)的新穎的誘導(dǎo)性對(duì)稱成體干細(xì)胞分裂機(jī)制有關(guān)。所得擴(kuò)增的成體干細(xì)胞可用于治療多種與人類衰老和細(xì)胞功能障礙相關(guān)的疾病，包含但不限于阿茲海默癥、帕金森氏癥、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病、中風(fēng)、糖尿病、骨質(zhì)疏松癥、心肌梗塞、血友病、貧血癥、AIDS、白血病、淋巴瘤及許多類型的癌癥及老化疾病。

優(yōu)先權(quán)：

本發(fā)明主張于2018年7月2日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)案，申請(qǐng)?zhí)朜o.62/692,862 的優(yōu)先權(quán)，其標(biāo)題為“體外誘導(dǎo)CD34陽(yáng)性成體干細(xì)胞增殖”，其全部公開內(nèi)容通過引用并入于此。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明大體上是關(guān)于一種誘導(dǎo)成體干細(xì)胞(ASC)活體外增殖及/或分化的組合物及其使用方法，其使用某些較小非編碼RNA(snRNA)以及一些定義蛋白因子，包括小發(fā)夾樣RNA(shRNA)、microRNA前驅(qū)物(pre-miRNA)及/或短干擾RNA(siRNA)以及由以下組成的一或多個(gè)定義因子：堿性纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(FGF-2)、白血病抑制因子(LIF)、似胰島素生長(zhǎng)因子(IGF)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血小板分化的生長(zhǎng)因子(PDGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、轉(zhuǎn)型生長(zhǎng)因子(TGF)、腫瘤壞死因子(TNF)、干細(xì)胞因子(SCF)、同源盒蛋白質(zhì)(HOX)、 Notch、GSK、Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)、介白素及/或骨成形性蛋白質(zhì)(BMP)。具體而言，本發(fā)明是關(guān)于一種誘導(dǎo)CD34+成體干細(xì)胞(CD34+ASC)活體外增殖及/或分化的組合物及其使用方法，其使用miR-302模擬shRNA、pre-miRNA 及/或siRNA，含有與5'-UAAGUGCUUC CAUGUUU-3'同源的共用序列，且進(jìn)一步結(jié)合使用選自以下的一或多個(gè)定義因子：bFGF/FGF-2、LIF、IGF、EGF、 PDGF、VEGF、TGF、TNF、SCF、HOX、Notch、GSK、Wnt/β-連環(huán)蛋白、介白素及/或BMP。誘導(dǎo)成體干細(xì)胞增殖及分化的原理與近年來在皮膚傷口愈合活體內(nèi)模型中發(fā)現(xiàn)的新穎的誘導(dǎo)性對(duì)稱成體干細(xì)胞分裂機(jī)制有關(guān)。所得擴(kuò)增的成體干細(xì)胞適用于治療多種人類衰老相關(guān)病癥及細(xì)胞功能障礙相關(guān)病癥，包含但不限于阿茲海默癥(Alzheimer's disease)、帕金森氏癥 (Parkinson's disease)、運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元疾病、中風(fēng)、糖尿病、骨質(zhì)疏松癥、心肌梗塞、血友病、貧血癥、艾滋病(AIDS)、白血病、淋巴瘤及許多類型的癌癥。值得注意地，本發(fā)明亦適用于由向身體供應(yīng)無限擴(kuò)增的自身成體干細(xì)胞，以便活體內(nèi)修復(fù)及再生受損及/或衰老組織及器官來預(yù)防衰老以及治療衰老相關(guān)的退行性不適。

背景技術(shù)

干細(xì)胞類似于含有眾多有效成分的生命百寶箱，其適用于刺激新細(xì)胞及組織再生、修復(fù)及/或再生受損/老化組織、治療退行性疾病及預(yù)防腫瘤/癌癥形成及進(jìn)展。因此，可設(shè)想，我們可使用此等干細(xì)胞作為新穎藥物篩檢、鑒別、分離及制造的工具。因此，由此獲得的藥物可適用于開發(fā)醫(yī)藥及治療應(yīng)用，諸如用于研究、診斷及/或療法使用的生物醫(yī)學(xué)利用、裝置及/或設(shè)備及其組合。