[發明專利]活體外誘導成體干細胞增殖及分化

在審

• 申請號: 201880095376.1
• 申請日: 2018-09-19
• 公開（公告）號: CN112912492A
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發明（設計）人: 林希龍;林羿秀;張欽次
• 申請（專利權）人: 林希龍;林羿秀;張欽次
• 主分類號: C12N5/074
• 分類號: C12N5/074;C12N5/0789;C12N5/0797;C12N15/113;A61K38/18;A61K38/20;A61K35/12;A61K35/30;A61K35/28;A61K35/36;A61P25/28;A61P25/16;A61P25/00;A61P9
• 代理公司: 中國商標專利事務所有限公司 11234
• 代理人: 曾海艷

1.一種用于誘導CD34+成體干細胞(CD34+ASC)活體外增殖及分化的組合物及方法，其包含：

(a)提供含有SEQ.ID.NO.7的至少一小RNA。

(b)提供含有LIF及bFGF/FGF2的至少一傷口愈合相關定義因子；及

(c)在活體外細胞培養條件下將(a)該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA與(b)該含有LIF及bFGF/FGF2的傷口愈合相關定義因子混合在一起，以誘導且維持該CD34+成體干細胞的增殖及分化。

2.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞為皮膚成體干細胞。

3.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞為造血干細胞。

4.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞為神經干細胞。

5.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞能夠活體內形成成體干細胞利基或囊。

6.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞能夠分化成造血、神經元、皮膚、毛發、甲狀腺組織細胞類型。

7.如權利要求1所述的方法，其中該CD34+成體干細胞具有多潛能性。

8.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA含有至少一發夾樣莖環結構。

9.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA含有至少一發夾樣microRNA前驅物。

10.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA為miR-302前驅物(pre-miR-302)。

11.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA為SEQ.ID.NO.1、SEQ.ID.NO.2、SEQ.ID.NO.3或SEQ.ID.NO.4，或其組合。

12.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA為miR-302模擬siRNA。

13.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA能夠在該CD34+成體干細胞中進一步加工成SEQ.ID.NO.8、SEQ.ID.NO.9、SEQ.ID.NO.10或SEQ.ID.NO.11。

14.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA能夠下調AOF2(或稱作KDM1 a或LSD1)、DNMT1、HDAC2或HDAC4。

15.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA能夠引起DNA脫甲基化。

16.如權利要求1所述的方法，其中該含有SEQ.ID.NO.7的小RNA能夠增強且保持CD34+成體干細胞的多潛能性。

17.如權利要求1所述的方法，其中該含有LIF及bFGF/FGF2的傷口愈合相關定義因子可進一步包括選自以下的至少一選擇性因子：似胰島素生長因子(IGF)、表皮生長因子(EGF)、血小板衍生的生長因子(PDGF)、血管內皮生長因子(VEGF)、轉型生長因子(TGF)、腫瘤壞死因子(TNF)、干細胞因子(SCF)、同源盒蛋白質(HOX)、Notch、GSK、Wnt/β-連環蛋白信號、介白素及/或骨成形性蛋白質(BMP)。

18.如權利要求1所述的方法，其中該活體外細胞培養條件為在37℃下的無飼養層MSC增殖培養基。