[發明專利]治療或診斷TNF相關炎性疾病的TNF靶向適配體及其用途

在審

• 申請號: 201880094692.7
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN112567037A
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 楊泮池;賴薇云;王人緯
• 申請（專利權）人: 中央研究院;楊泮池
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;A61K31/711;A61P1/16;G01N33/53;G01N33/68
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉

本公開涉及與腫瘤壞死因子α(TNF)結合的核酸適配體。本公開進一步提供包含這些抗TNF適配體的醫藥組合物，以及將其用于治療和診斷應用的方法，例如，減輕肝損傷和于體內或體外監測TNF的存在。

相關申請的交叉引用

本申請主張于2018年4月20日提交的美國臨時申請62/660,324 的權益，其整體內容以引用的方式并入本文中。

技術領域

本公開涉及用于治療腫瘤壞死因子α(TNFα)相關炎性疾病的核酸適配體，以及將其用于治療和診斷應用的方法。

背景技術

腫瘤壞死因子α(TNFα或TNF)是參與炎癥的細胞因子。它主要由活化的巨噬細胞和其它如淋巴細胞、中性粒細胞和NK細胞的免疫細胞分泌。TNF在生理條件下形成同源三聚體，并與其受體TNFR1或 TNFR2結合以觸發下游NF-κB、MAPK或死亡信號傳導途徑，其調節細胞增殖、分化或凋亡。TNF在幾乎所有類型的炎性相關疾病中起作用，并且失調的TNF分泌引起包括類風濕性關節炎、牛皮癬、強直性脊柱炎、炎癥性腸道疾病、神經退行性疾病、肝損傷和癌癥的疾病。

然而，直接對抗TNF的抗體可誘導對抗例如枯否細胞(Kupffer cell) 和多形核白細胞等表達膜結合性TNF的細胞的抗體依賴性細胞介導細胞毒性(ADCC)和補體依賴性細胞毒性(CDC)，且未有用于TNF濃度的常規預測標記或用于在體內檢測TNF的診斷工具。此外，如抗體的蛋白質類藥物需要基于細胞的生產系統，其通常昂貴且具有批次間的變化。

因此，開發用于靶向和檢測TNF的非蛋白質類試劑是非常有意義的。

發明內容

本公開基于抗TNFα(即抗TNF)核酸適配體的開發，其在體外抑制TNF信號傳導并減弱體內TNF介導的急性肝損傷。

因此，本公開的一個方面的特征在于結合TNF且中和TNF活性的核酸適配體(抗TNF適配體)。本公開的任何核酸適配體的長度可以長達200個核苷酸(nts)。例如，抗TNF核酸適配體可以由40至100 個核苷酸組成。

在一些具體實施例中，核酸適配體包含具有 5’-GCGCCACTACAGGGGAGCTGCCATTCGAATAGGTGGGCCGC-3’ (SEQ ID NO：1)核苷酸序列的核酸基序(motif)。此抗TNF適配體可以包含與SEQ ID NO：1至少85％一致(例如，至少90％、至少95％或更高)的核酸序列。在一實施例中，核酸適配體包含SEQ ID NO：1 的核酸序列。在另一實施例中，核酸適配體由SEQ IDNO：1的核酸序列所組成。

在一些具體實施例中，核酸適配體與聚乙二醇(PEG)部分(moiety) 綴合(例如，分子量為約15至40kDa的PEG部分)。

在一些具體實施例中，核酸適配體呈現含有兩個核酸適配體復制物(copies)的二聚體形式。在一些具體實施例中，PEG部分鏈結該兩個核酸適配體復制物。

在一些具體實施例中，核酸適配體與可檢測標記綴合。

本公開另一方面的特征在于醫藥組合物，其包含本文所述的任何抗TNF適配體和藥學上可接受的載體。

在另一方面，本公開提供用于抑制個體中TNF活性的方法，其包括向有此需要的個體施用有效量的本文所述的任何核酸適配體。在一些具體實施例中，該個體為患有由TNFα介導的疾病、疑似患有由TNFα介導的疾病、或有由TNFα介導的疾病風險的人類患者(例如，類風濕性關節炎、牛皮癬、克羅恩病、急性肝損傷、急性肺損傷(ALI)、急性肺衰竭、全身性炎癥反應綜合征(SIRS)相關性腦病、急性呼吸窘迫綜合征、干眼癥、眼色素層炎、急性胰腺炎、急性腎小球損傷、急性腎功能衰竭、ANCA相關性血管炎或急性腦病)。在一些具體實施例中，個體已接受或正在進行涉及TNF拮抗劑的治療。在一些具體實施例中，個體處于疾病的急性期。