[發明專利]低內毒素含量的明膠水解物的制備方法

有效

• 申請號: 201880087138.6
• 申請日: 2018-11-22
• 公開（公告）號: CN111630124B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發明（設計）人: 約瑟夫·胡伯圖斯·奧利弗;埃利納·巴克伊贊;保羅·斯蒂文斯
• 申請（專利權）人: 羅賽洛公司
• 主分類號: C09H3/02
• 分類號: C09H3/02;C08H1/06;C08L89/06
• 代理公司: 北京弘權知識產權代理有限公司 11363
• 代理人: 郭放;許偉群

描述了一種制備具有降低的內毒素含量的明膠水解物的方法，該方法包括以下步驟：在溫度為70?125℃、pH在3.5以下的條件下溫育明膠或明膠水解物的溶液至少15分鐘，并回收明膠水解物。還描述了由此獲得的明膠水解物。

本發明涉及一種制備具有低的脂多糖(LPS)含量的明膠水解物的方法，并且涉及一種具有低的脂多糖含量的明膠水解物。

明膠是來源于膠原蛋白的水溶性蛋白質的混合物。明膠通過以下途徑獲得：例如通過膠原蛋白的部分水解，通過在酸性或堿性條件下對皮膚、筋腱、韌帶、骨頭等進行水提取而獲得，或通過酶促水解獲得。通過酸處理獲得的明膠稱為A型明膠，而B型明膠則源自基于堿的方法。

明膠不是由均一的蛋白質分子構成，而是包含可變量的可變長度的蛋白質分子，其平均分子量高達200-250kDa。因此，明膠的分子量分布是一個重要的參數，其通常造成或確定明膠的關鍵和重要特性，諸如黏度和bloom值或凝膠強度。

明膠在室溫下形成熱可逆性凝膠，并溶于熱水中。明膠通常用于各種行業中，例如在食品、藥品和化妝品應用中等等，例如在水果膠(fruit?gum)和明膠甜點中作為膠凝劑和調質劑(texturizer)，但也可用于醫學領域，例如用于血漿替代物和基于明膠的植入物。

所述分子量因不同的提取溫度和條件等等而變化。結果，bloom(凝膠強度)和黏度也會變化。溫度是明膠制備中的重要參數(例如，在明膠可用于食品、藥品、科技和醫學應用中之前的純化條件)并通常需要仔細控制。當使用明膠時，在膠凝特性和黏度很重要的應用中，60℃的溫度被認為是最高處理溫度，但是在容許部分膠凝能力(gelling?capacity)和/或黏度損失的情況下可以接受高達例如62℃或65℃的溫度持續有限的時間段例如5或10至30或45分鐘。

明膠的分子量分布通常通過尺寸排阻HPLC(高效液相色譜)技術來測量，洗脫的級分通過UV吸收來檢測，并且所測量的數據通過合適的軟件來評價，所有的技術是本領域已知的，參見例如Olijve等人，Journal?of?Colloid?and?Interface?Science(膠體與界面科學)(2001)243，476-482。對于平均分子量小于70kDa例如小于20kDa的水解明膠，可以使用相同的方法，但優選使用分離柱例如TSKgel2000SWXL(TosohBioScience，日本)以獲得高分離度(resolution)(張等人，Food?hydrocolloids(食品膠體)23(2009)2001-2007)。

明膠的黏度(動態黏度)通常是通過測量6.67w/w％的明膠溶液在60℃下通過標準流管(flow?pipet)的流動時間來測量的，參見2014年的GME?Monograph?StandardizedMethods?for?the?testing?of?Edible?Gelatin(GME專論食用明膠檢測的標準方法)第10版(GME，比利時布魯塞爾)，本文也稱為“GME10”，第2.4.2章，第81-86頁。

6.67w/w％的明膠的凝膠強度可以通過標準化設備(參見GME10)來測定，如QTS25質構儀(Brookfield黏度計)或質構儀TA-XT2(英國倫敦Stable?Micro?Systems?Ltd.)，并用bloom數(此處也稱為“bloom值”，參見GME10)表示。