[發明專利]用于檢測微生物的組合物和方法

在審

• 申請號: 201880085561.2
• 申請日: 2018-11-06
• 公開（公告）號: CN111801429A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: N.科托夫;J.S.瓦內普斯;K.沃德
• 申請（專利權）人: 密歇根大學董事會
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12Q1/14;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/445;C12R1/32;C12R1/46;C12R1/44;C12R1/42;C12R1/19;C12R1/01;C12R1/38
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 羅文鋒;黃希貴

1.一種檢測生物樣品中的多種微生物的方法，其包括：

a) 對生物樣品進行核酸擴增以產生多種不同長度的包含納米顆粒的擴增產物；

b) 在摻入所述擴增產物中的所述納米顆粒上沉積金屬殼以產生包含金屬包覆的納米顆粒的擴增產物；和

c) 使用圓二色性(CD)檢測所述包含金屬包覆的納米顆粒的擴增產物。

2.權利要求1的方法，其中所述擴增為PCR。

3.權利要求2的方法，其中所述PCR利用多種正向和反向引物，其中所述引物附著于納米顆粒。

4.權利要求1-3中任何一項的方法，其中所述納米顆粒為金納米顆粒。

5.權利要求3或4的方法，其中所述正向和所述反向引物包含不同大小的納米顆粒。

6.權利要求1-5中任何一項的方法，其中所述納米顆粒為納米棒。

7.權利要求1-6中任何一項的方法，其中所述包含金屬納米顆粒的擴增產物組裝成并排的梯，所述梯在納米顆粒之間包含間隙距離。

8.權利要求1-6中任何一項的方法，其中所述不同長度的擴增產物呈現出不同波長的CD峰。

9.權利要求1-7中任何一項的方法，其中所述金屬殼為金、銅或銀。

10.權利要求1-9中任何一項的方法，其中所述微生物為細菌。

11.權利要求10的方法，其中所述細菌為病原細菌。

12.權利要求10或11的方法，其中所述細菌為抗生素抗性細菌。

13.權利要求3的方法，其中所述引物擴增多個生物體特異性和/或抗生素抗性基因。

14.權利要求1-13中任何一項的方法，其中所述生物樣品為全血。

15.權利要求14的方法，其中在進行所述方法之前，不對所述樣品進行培養或純化。

16.權利要求1-15中任何一項的方法，其中所述方法在3小時或更短的時間內進行。

17.權利要求1-16中任何一項的方法，其中所述方法在2.5小時或更短的時間內進行。

18.權利要求1-17中任何一項的方法，其進一步包括在進行所述方法之前使所述樣品與抗生素接觸的步驟。

19.一種檢測生物樣品中的多種微生物的方法，其包括：

a) 使包含病原細菌的生物樣品與抗生素接觸；

b) 對所述生物樣品進行擴增產生多種不同長度的包含納米顆粒的擴增產物；

c) 在摻入所述擴增產物中的所述納米顆粒上沉積金屬殼以產生包含金屬包覆的納米顆粒的擴增產物；和

d) 使用圓二色性(CD)檢測所述包含金屬包覆的納米顆粒的擴增產物。

20.權利要求19的方法，其中所述擴增為PCR。

21.權利要求20的方法，其中所述擴增利用多種正向和反向引物，其中所述引物附著于納米顆粒。

22.權利要求19-21中任何一項的方法，其中所述生物樣品與所述抗生素一起培養。

23.權利要求19-22中任何一項的方法，其中所述納米顆粒為金納米顆粒。