[發(fā)明專(zhuān)利]制備分離基質(zhì)的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880082451.0
• 申請(qǐng)日: 2018-12-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111511467A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G.羅德里格;M.安德?tīng)?/a>;R.帕姆格倫;T.比約克曼
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 通用電氣醫(yī)療集團(tuán)生物工藝研發(fā)股份公司
• 主分類(lèi)號(hào): B01J20/286
• 分類(lèi)號(hào): B01J20/286;B01J20/32;C07K1/22
• 代理公司: 中國(guó)專(zhuān)利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;黃希貴

1.一種制備分離基質(zhì)的方法，包括以下步驟：

a) 提供固體載體和衍生自細(xì)菌免疫球蛋白-結(jié)合蛋白的堿穩(wěn)定性配體；

b) 使所述堿穩(wěn)定性配體與所述固體載體反應(yīng)以形成具有共價(jià)偶聯(lián)的堿穩(wěn)定性配體的分離基質(zhì)；和

c) 用包含至少10 mM的堿金屬氫氧化物，例如NaOH或KOH或其任何混合物的洗滌溶液洗滌所述具有共價(jià)偶聯(lián)的堿穩(wěn)定性配體的分離基質(zhì)。

2.權(quán)利要求1的方法，其中所述衍生自細(xì)菌免疫球蛋白-結(jié)合蛋白的堿穩(wěn)定性配體是堿穩(wěn)定性蛋白A配體。

3.權(quán)利要求1的方法，其中所述衍生自細(xì)菌免疫球蛋白-結(jié)合蛋白的堿穩(wěn)定性配體是堿穩(wěn)定性蛋白L配體。

4.權(quán)利要求1的方法，其中所述衍生自細(xì)菌免疫球蛋白-結(jié)合蛋白的堿穩(wěn)定性配體是堿穩(wěn)定性蛋白G配體。

5.任何前述權(quán)利要求的方法，其中所述固體載體包含多個(gè)載體顆粒，例如多個(gè)多孔的載體顆粒。

6.任何前述權(quán)利要求的方法，其中步驟c)重復(fù)至少1次。

7.任何前述權(quán)利要求的方法，其中步驟c)重復(fù)至少5次。

8.任何前述權(quán)利要求的方法，進(jìn)一步包括在步驟c)之后，轉(zhuǎn)移所述分離基質(zhì)至儲(chǔ)存溶液的步驟d)。

9.權(quán)利要求8的方法，進(jìn)一步包括在步驟d)之后，分配所述分離基質(zhì)到運(yùn)輸容器中的步驟。

10. 任何前述權(quán)利要求的方法，其中步驟c)在步驟b)之后的24 h內(nèi)進(jìn)行。

11. 任何前述權(quán)利要求的方法，其中在步驟c)中，所述洗滌溶液包含25 mM – 1 M的堿金屬氫氧化物，例如NaOH或KOH或其任何混合物。

12. 任何前述權(quán)利要求的方法，其中在步驟c)中，所述洗滌溶液包含40 mM – 1 M的堿金屬氫氧化物，例如90 mM – 0.5 M的堿金屬氫氧化物，或50 – 200 mM的堿金屬氫氧化物。

13. 任何前述權(quán)利要求的方法，其中在步驟c)中，所述洗滌溶液包含40 mM – 1 MNaOH或KOH，例如90 mM – 0.5 M NaOH或KOH，或50 – 200 mM NaOH或KOH。

14. 任何前述權(quán)利要求的方法，其中在步驟c)中，在2-60 min，例如5-30 min期間用洗滌溶液孵育所述分離基質(zhì)。

15.權(quán)利要求14的方法，其中在孵育之后，通過(guò)過(guò)濾除去所述洗滌溶液。

16.任何前述權(quán)利要求的方法，其中在步驟c)中，溫度是2-40℃，例如15-30℃或20-25℃。

17.任何前述權(quán)利要求的方法，進(jìn)一步包括在步驟b)之前，活化所述固體載體的步驟a’)。

18.權(quán)利要求17的方法，其中步驟a’)包括在所述固體載體上形成醛基團(tuán)。

19.權(quán)利要求17的方法，其中步驟a’)包括在所述固體載體上形成環(huán)氧化物基團(tuán)。

20.權(quán)利要求19的方法，其中在步驟b)之后，所述分離基質(zhì)包含殘留的環(huán)氧化物基團(tuán)。

21. 權(quán)利要求15 – 17中任一項(xiàng)的方法，其中所述衍生自細(xì)菌免疫球蛋白-結(jié)合蛋白的堿穩(wěn)定性配體包含能夠與所述醛或環(huán)氧化物基團(tuán)反應(yīng)的賴(lài)氨酸殘基。