[發明專利]檢測急性博爾納病病毒(BDV)感染的方法及其診斷試劑盒，特別是組合區分急性及慢性和潛伏性BDV感染的方法及其診斷試劑盒

在審

• 申請號: 201880072287.5
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN111316100A
• 公開（公告）日: 2020-06-19
• 發明（設計）人: H·路德維希;L·博德
• 申請（專利權）人: H·路德維希;L·博德
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健;林曉紅

1.一種用于檢測急性博爾納病病毒(BDV)感染的方法，包括通過夾心ELISA確定樣品中由p24 BDV磷蛋白和p40 BDV核蛋白組成的異二聚體的存在的步驟，第一一抗以固定化狀態存在，在將所述樣品與所述固定化第一抗體溫育后，第二一抗以非固定化狀態加入，特征在于所述第一一抗針對p24 BDV磷蛋白而所述第二一抗針對p40 BDV核蛋白，或反之。

2.權利要求1所述的方法，特征在于所述一抗之一針對磷酸化的p24 BDV磷蛋白而所述第二一抗針對p40 BDV核蛋白表位，特別是在BDV核蛋白上與BDV磷蛋白結合結構域不重疊的那些表位，以確定由p24 BDV磷蛋白和p40 BDV核蛋白組成的p24磷酸化異二聚體。

3.前述權利要求任一項所述的方法，特征在于所述固定化一抗通過第一二抗以固定化狀態存在于表面上或已經直接固定化在所述表面上。

4.前述權利要求任一項所述的方法，特征在于所述非固定化第二一抗通過包含報道分子的第二二抗測定。

5.前述權利要求任一項所述的方法，其中所述第一一抗和第二一抗源自不同物種和/或其中所述一抗是單克隆抗體。

6.前述權利要求任一項所述的方法，其中所述一抗源自相同物種，但是屬于不同免疫球蛋白類別或不同免疫球蛋白亞類，特別是其中第一一抗是源自亞類IgG1的小鼠的單克隆抗體以及所述第二一抗是源自亞類IgG2的小鼠的抗體，或反之。

7.前述權利要求任一項所述的方法，其中所述二抗來自不同物種或源自相同物種。

8.前述權利要求任一項所述的方法，特征在于另外檢測了由BDV抗原，特別是p24蛋白和/或p40蛋白，以及與其附著的特異性抗體組成的循環免疫復合物(CIC)。

9.前述權利要求中任一項所述的方法，特征在于另外檢測了針對p24蛋白和/或p40蛋白的循環游離抗體，特別是針對磷酸化p24蛋白和針對p40蛋白的循環游離抗體。

10.前述權利要求任一項所述的方法，特征在于所述方法用于診斷和/或病程監測，包括區分急性BDV感染與慢性和潛伏性感染和/或對其病程監測以及排除BDV感染，特別是精神和/或神經疾病中的BDV感染，以及在與群體的精神和身體健康有關的流行病學研究中確定感染的患病率。

11.權利要求10所述的方法，特征在于所述方法用于在與免疫防御能力下降相關的其它慢性疾病和與其它病原體的慢性感染情況中以及在需要用藥物治療以降低或抑制免疫系統的疾病情況中，用于鑒別診斷和排除BDV感染，包括區分急性BDV感染與慢性和潛伏性感染和/或其病程監測。

12.一種用于檢測急性BDV感染的夾心ELISA的診斷試劑盒，其包含第一一抗和第二一抗，所述一抗之一針對p24 BDV磷蛋白而另一個一抗針對p40 BDV核蛋白；至少一個用報道分子標記的二抗；任選地，將一抗固定化在表面上的手段以及進行權利要求1-11任一所述的方法的說明書。

13.權利要求12所述的用于檢測急性BDV感染的夾心ELISA的診斷試劑盒，其中所述一抗是權利要求2、5和6任一項所定義的。

14.權利要求12或13所述的用于檢測急性BDV感染的夾心ELISA的診斷試劑盒，其中所述二抗是權利要求4和7任一項所定義的。

15.權利要求12-14任一項所述的診斷試劑盒，進一步包含檢測由BDV抗原及與其附著的特異性抗體組成的CIC的手段。