[發明專利]應用節桿菌屬微生物制備轉果糖基甜菊苷的方法

在審

• 申請號: 201880068907.8
• 申請日: 2018-10-25
• 公開（公告）號: CN111511909A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發明（設計）人: 楊泰周;姜仁聲;金敏會;樸晟喜;秋善;金成俌;李英美;李英秀;崔殷姃
• 申請（專利權）人: CJ第一制糖株式會社
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26;C12P19/56;C07H15/24
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 張莉;黃革生

本公開涉及用于制備轉果糖基甜菊醇糖苷的方法，其中使用節桿菌屬微生物；其培養物；培養物的上清液；培養物的提取物；或微生物的裂解物。

[技術領域]

本發明公開涉及應用節桿菌屬(Arthrobacter)微生物制備轉果糖基化甜菊醇糖苷(transfructosylated steviol glycoside)的方法。

[背景技術]

由于對蔗糖消耗引起的疾病(肥胖)的擔憂，世界衛生組織(WHO)建議降低每日糖攝入量，因此發達國家政府正在積極討論旨在減少糖攝入量的各種政策。因此，隨著市場上各種替代性甜味劑開發需求的不斷增長，替代性甜味劑正在不斷被開發和商業化。作為替代性甜味劑，這些是對合成的高強度甜味劑(例如，糖精，阿斯巴甜，三氯蔗糖等)、合成的糖醇(例如麥芽糖醇和木糖醇)和高強度甜味劑(例如，甜葉菊甙A(Rebaudioside A)和甘草(Liquorice))形式的不斷變化。然而，由于對合成甜味劑安全性的擔憂，客戶對天然甜味劑的需求一直在穩步增長；然而，由于天然甜味劑的特殊風味特性(即，雜味和異味)的局限性，天然甜味劑不能完全替代基于合成甜味劑的現有低卡路里和零卡路里的產品。

從甜葉菊(Stevia rebaudiana Bertoni)的葉中提取的甜菊糖(stevia)，是近年來獲得廣泛關注的一種天然高強度甜味劑。甜菊糖是一種天然材料，其甜度是蔗糖(sugar)的200至300倍。此外，甜菊糖由甜菊苷(Stevioside)、甜葉菊甙A,B,C,D,E,和M、杜克苷A(Dulcoside A)、甜茶苷(Rubusoside)等組成。此外，甜菊糖具有作為替代甜味劑的潛在用途，因為據報道它不產生卡路里，對血糖和胰島素水平是積極的，并且對人體無副作用；然而，甜菊糖具有苦味，這限制了其使用。

迄今為止，已經有三種改善甜菊糖的甜度的方法：(1)與糖甜味劑、氨基酸或氨基酸鹽混合的方法，(2)包括諸如環糊精的物質的物理方法；(3)利用酶轉移葡萄糖的方法。作為利用酶轉移糖的方法，在本領域中廣泛應用的是，利用CGTase將1至12個葡萄糖分子轉移至甜菊醇糖苷的方法(韓國專利申請號10-1991-0020769)。然而，這種方法的缺點在于，轉移至甜菊醇糖苷的所有葡萄糖均會被腸道微生物降解，從而增加了卡路里。因此，需要一種制備甜菊醇糖苷的新方法，其中轉移非葡萄糖的糖。

[發明內容]

[技術問題]

通過如下發現，本發明人完成了本發明：使用節桿菌屬的四種微生物，存在通過β鍵向甜菊醇糖苷轉果糖基的活性。

[技術方案]

本公開的一個目的是，提供用于制備轉果糖基化的甜菊醇糖苷的方法，其中使用一種或多種選自以下的節桿菌屬細菌：球形節桿菌(Arthrobacter globiformis)，結晶節桿菌(Arthrobacter crystallopoietes)，產脲節桿菌(Arthrobacter ureafaciens)和金黃節桿菌(Arthrobacter aurescens)；其培養物；培養物的上清液；培養物的提取物；或微生物的裂解物。

本發明的另一目的是，提供根據上述制備方法制備的轉果糖基的甜菊醇糖苷。

本發明的再一目的是，提供用于產生轉果糖基甜菊醇糖苷的組合物，所述組合物包含一種或多種選自以下的節桿菌屬細菌：球形節桿菌，結晶節桿菌，產脲節桿菌和金黃節桿菌；其培養物；培養物的上清液；培養物的提取物；和微生物的裂解物。

[有益效果]

用于制備轉果糖基甜菊醇糖苷的本發明方法可以通過使用一種或多種選自以下的節桿菌屬細菌：球形節桿菌，結晶節桿菌，產脲節桿菌和金黃節桿菌；其培養物；培養物的上清液；培養物的提取物；和微生物的裂解物，特異地產生轉果糖基甜菊醇糖苷。根據本發明的轉果糖基甜菊醇糖苷是苦味得以改善的高強度甜味劑物質，其卡路里含量不高于已知的轉果糖基甜菊醇糖苷，并且由此可以用于各種領域。