[發明專利]XVI型膠原蛋白測定

在審

• 申請號: 201880068100.4
• 申請日: 2018-10-19
• 公開（公告）號: CN111602056A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: C·詹森;J·H·莫特森;N·維盧姆森;M·A·卡瑞斯戴爾
• 申請（專利權）人: 北歐生物科技公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;C07K16/18;G01N33/574
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務所(普通合伙) 33239
• 代理人: 周積德

本發明涉及一種XVI型膠原蛋白測定法及其在評估與XVI型膠原蛋白有關的疾病(特別是結腸直腸癌和潰瘍性結腸炎)中、并且用于鑒定患有(或可能發展為)纖維狹窄的5種克羅恩病患者亞組的用途。

技術領域

本發明涉及一種XVI型膠原蛋白測定法及其在評估與XVI型膠原蛋白有關的疾病(特別是結腸直腸癌和潰瘍性結腸炎)中、并且用于鑒定患有(或可能發展為)纖維狹窄的克羅恩病患者亞組的用途。

背景技術

細胞外基質(ECM)是負責維持組織結構的非細胞成分。改變的ECM重塑是胃腸道(GI)疾病病理的重要部分，例如結腸直腸癌(CRC)(1)和潰瘍性結腸炎(UC)(2)。ECM形成與結腸降解之間的不平衡會導致ECM組成發生變化，從而導致組織功能異常。ECM蛋白在腫瘤微環境中沉積的增加會增加ECM的硬度，從而影響細胞功能，例如細胞增殖、粘附、遷移和侵襲(3、4)。還已經明顯的是，腫瘤微環境中的炎癥反應影響ECM重塑(5、6)。同樣，在UC中，腸道的ECM受到慢性炎癥的嚴重影響，慢性炎癥導致組織穩態的喪失和膠原蛋白代謝失衡(2、7-9)。慢性炎癥和上皮細胞的持續更新導致發育異常，這可能轉化為CRC(10)。因此，反映出這種增強的ECM重塑的生物標記物可能對于鑒定導致CRC和UC發生和發展的組織/ECM結構中斷的患者很重要。

在腸道中，XVI型膠原蛋白(以下稱為col-16)被認為有助于穩定和維持基底膜，基底膜是位于上皮和內皮細胞層下方的ECM專用層(11)。Col-16是一種與纖維相關的膠原蛋白，具有中斷的三重螺旋(FACIT)，并由上皮細胞和上皮下成肌纖維細胞表達。它們位于基底膜之下，并且col-16明顯沉積在上皮隱窩的基質中(11)。皮膚研究表明col-16位于基膜附近的真皮-表皮交界區，這表明col-16在將微纖維錨定到基膜上起積極作用(12、13)。

Col-16與α1β1和α2β1整合素相互作用，并誘導這些整合素募集到局灶性斑塊中，從而促進整合素介導的細胞反應，例如細胞擴散和細胞形態改變(14、15)。col-16與整聯蛋白的結合刺激細胞-基質相互作用，據推測這可能在腫瘤細胞中誘導侵襲性表型。有趣的是，在口腔鱗狀細胞癌(OSCC)中，col-16的過度表達已顯示出誘導細胞侵襲和增殖性細胞表型的作用(16、17)。Col-16沉積在正常口腔上皮的基底膜上，而在OSCC患者的組織中它似乎從基底膜上消失了(17)。在OSCC發育過程中，從基底膜區損失的col-16可能誘導ECM重塑，破壞基底膜，從而促進腫瘤細胞浸潤和疾病進展。在膠質母細胞瘤中，col-16參與了腫瘤細胞的粘附和侵襲以及ECM的腫瘤特異性重塑(18、19)。

從發炎的克羅恩病組織活檢組織中分離出的腸上皮下成纖維細胞中也檢測到col-16表達的增加(11)。

發明人現在已經在col-16與UC和CRC之間建立了病理聯系，并且還開發了一種用于鑒定患有(或可能發展為)纖維狹窄的狹窄的克羅恩病患者亞組的方法。

發明概述

因此，在第一方面，本發明涉及一種檢測人生物流體樣品中XVI型膠原蛋白或其片段的方法，所述方法包括：

a)從人患者獲得生物流體樣品；和

b)使所述生物流體樣品和與具有C末端氨基酸序列PMKTMKGPFG(SEQ ID NO：1)的C末端生物標記物特異性反應的單克隆抗體接觸，并檢測所述生物標記物與所述抗體之間的結合。

檢測優選是定量的。

優選地，提高針對具有氨基酸序列PMKTMKGPFG(SEQ ID NO：1)的合成肽的單克隆抗體。合成肽可以與載體蛋白連接，所述載體蛋白例如但不限于匙孔戚血藍蛋白(KLH)。