[發明專利]灌注生物反應器及相關使用方法

在審

• 申請號: 201880066815.6
• 申請日: 2018-10-15
• 公開（公告）號: CN111212899A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 馬修·安吉里尼;艾什莉·威特梅爾;安東尼·德比亞茲
• 申請（專利權）人: 里珍納龍藥品有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/34
• 代理公司: 上海和躍知識產權代理事務所(普通合伙) 31239
• 代理人: 尹洪波

1.一種控制生物反應器系統的方法，包括：

提供生物反應器中的細胞培養物，其中生物反應器中的條件能讓細胞培養物產生感興趣蛋白(POI)，

以拉曼(RAMAN)探針測量生物反應器內細胞培養物的一或多個工藝參數(PP)，其中該工藝參數選自由營養素濃度、活細胞濃度和蛋白屬性組成之群組，

測量含細胞培養物的生物反應器重量，

使用第一輸出導管以第一特定比率從細胞培養物移出無細胞之用過的培養基，

使用第二輸出導管以第二特定比率從細胞培養物移出細胞，使用輸入導管以第三比率將新鮮培養基或營養素或二者導入細胞培養物中，且

其中該輸入和輸出導管以拉曼探針測量值及生物反應器的重量測量值為基準加以調整，以維持(i)一或多項工藝參數在預定的范圍內，(ii)含細胞培養物之生物反應器重量在預定的范圍內，及(iii)輸入導管的第三特定比率以及各輸出導管的第一和第二特定比率在其各自的預定范圍內。

2.如權利要求1所述的方法，其中通過拉曼測量生物反應器內細胞培養物的一或多項工藝參數至少每小時進行一次。

3.如前述權利要求任一項中所述的方法，其中該方法配置為將細胞培養物以穩定狀態維持在每毫升(mL)至少約3千萬個細胞之平均活細胞濃度歷時30天。

4.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該生物反應器具有至少約10L之容積，而該方法配置為將生物反應器和細胞培養物之重量維持在20g的范圍內。

5.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該生物反應器具有至少10L的容積，且該方法配置為將含細胞培養物的生物反應器重量維持在最初含細胞培養物的生物反應器重量之0.1百分比內。

6.如前述權利要求任一項所述的方法，其中，當工藝參數偏離各自期望范圍內的設定值時，則調整以下一項或多項：移出無細胞之培養基、移出細胞和導入新鮮培養基或營養素或二者，以降低偏差。

7.如前述權利要求任一項所述的方法，其中每天經由第一輸出導管移出至少二個生物反應器體積的用過的培養基。

8.如前述權利要求任一項所述的方法，其中每天經由第一輸出導管移出至高三個生物反應器體積的用過的培養基。

9.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該工藝參數包括細胞培養物的溫度和細胞培養物的pH，且溫度維持在約35至36℃之間，而pH維持在6.85至7.15之間。

10.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該工藝參數包括細胞單位生產率，且該方法配置為將細胞培養物內的細胞維持在至少約15-25pg/細胞/天的細胞單位生產率歷時至少25-37天。

11.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該工藝參數包括葡萄糖濃度，且該方法配置為將葡萄糖濃度維持在約5mM至約85mM，或約1g/L至約15.5g/L。

12.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該工藝參數包括乳酸濃度，且該方法配置為將乳酸濃度維持在低于約60mM，或低于約6g/L。

13.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該工藝參數包括氨濃度，且該方法配置為將氨濃度維持在低于約15mM。

14.如前述權利要求任一項所述的方法，其中移出無細胞之用過的培養基、移出細胞和導入新鮮培養基或營養素或二者中的每一項通過各自的泵來控制。

15.如前述權利要求任一項所述的方法，其中該生物反應器包括配置用來保留細胞及讓液體通過的過濾器。