[發明專利]用于檢測白色念珠菌的多孔材料、使用它的診斷方法及其制備方法

在審

• 申請號: 201880066727.6
• 申請日: 2018-08-23
• 公開（公告）號: CN111212922A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: A·里貝斯·蒙帕雷;E·阿斯納爾·希梅諾;R·馬丁內斯·馬內斯;F·桑塞農·加拉爾薩;M·D·馬爾克斯·馬丁內斯;M·A·托莫·馬斯;J·裴曼·加西亞;L·F·馬薩爾·加維;E·希弗雷·佩雷斯
• 申請（專利權）人: 瓦侖西亞理工大學;M.P.網絡生物醫學研究中心財團;瓦倫西亞大區信仰理工大學及附屬醫院下屬信仰基金會健康研究院;羅維拉-威爾吉利大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6816;C12Q1/04
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 譚友丹

本發明涉及一種用于檢測白色念珠菌的多孔材料，以及使用該多孔材料的診斷方法及其制備方法。具體來說，本發明描述獲得一種制備用于識別病原微生物白色念珠菌的DNA的新型多孔材料，及其在快速且高度靈敏的體外診斷方法中的使用。

技術領域

本發明屬于新材料領域，應用于生物學、藥理學和醫學意義的物種檢測的，此類新材料可應用于原位診斷方法。具體來說，本發明公開獲得一種制備用于識別病原微生物白色念珠菌的DNA的新型多孔材料及其在快速、高靈敏的體外診斷方法中的使用。

背景技術

近年來，在不同科技領域中具有多種應用的有機-無機雜化材料的開發有了顯著的增長。在這些雜化材料中，通過考慮“分子門”概念而開發的材料因其在可控釋放和分子標識過程中的潛在應用而脫穎而出。用“分子門”功能化的雜化材料由能夠在其內部孔隙中儲存特定類型的分子/物種的多孔載體組成，并且還具有錨定在其外表面上的有機或無機基團，此類基團可以是分子或超分子，其中所述基團能夠通過施加外部刺激(稱為對載體加載)來調制儲存在其內部孔隙中的分子的釋放。這些材料代表一種非常有前途的技術，并且近年來在諸如生物工程、生物檢測和生物納米技術的領域中得到了廣泛的研究，從而開辟了新的視野^1,2。最常用于控制“分子門”的打開/關閉的外部刺激可分為：光化學，電化學，離子(pH值變化、某些陽離子和陰離子的存在)，溫度變化，極性變化，或某些分子或生物分子(酶、抗原/抗體系統、單一DNA鏈等)的存在^3-5。這些外部刺激的施加可能會誘導在正確的地點和時間以可控的方式釋放指示物種(染料、熒光團、具有氧化還原活性的物質、等離子體共振或具生物活性的物種，如細胞毒性劑、蛋白質、小生物分子、酶或核酸片段)^6-12。盡管這種應用非常重要，但是在識別和檢測協議中，很少描述用“分子門”功能化的有機-無機雜化材料的應用示例^13-15a和15b。

為了將具有“分子門”的雜化材料應用到檢測方法中，通常用指示物種裝載無機載體的孔隙，并用(生物)分子、超分子或無機顆粒對固體的外表面進行功能化。載體的功能化是指在載體的外表面上鍵合或錨定與特定目標分析物相互作用的某些(生物)分子、超分子或無機顆粒，從而在載體的孔隙入口處誘導空間變化；因此，在不存在目標分析物的情況下，“分子門”將會關閉，因為錨定在載體外表面上的生物分子、超分子或無機顆粒會阻礙或抑制包含在內部孔隙中的分子的釋放。然而，在存在目標分析物的情況下，它將誘導充當“分子門”的(生物)分子、超分子或無機顆粒的結構/構象發生變化，并將釋放內部孔隙的負載。到溶液中的這種釋放將會反映在物理、化學或生物變化中(例如，顏色或熒光)，此類變化可以很容易地量化^16-17。這種新的檢測概念不同于經典的“配位亞單位-指示亞單位”超分子系統，因為識別過程與信號過程是分離的^18-24。此外，這種新協議的另一個優點是信號的放大。例如，在這些材料中，據描述，少量分析物分子的存在可能會誘導從載體的孔隙內部中釋放大量指示物種²⁵。

此外，在過去幾十年里，由酵母菌引起的院內感染病例(如念珠菌病)在住院患者中有所增加²⁶。念珠菌有各種潛在的危險菌株，但是大多數侵襲性的感染是由白色念珠菌引起的。因此，迅速、明確地診斷由該物種引起的感染病例是非常重要和有意義的。此外，能夠區分白色念珠菌和其它物種也是很重要的，因為在每種情況下必須遵循不同的處理方法。事實上，白色念珠菌對最常用的抗菌劑氟康唑具有固有的耐藥性²⁷。目前，有可靠的方法來檢測白色念珠菌，但是，它們速度慢、費用高，而且依賴于有專門受過訓練的人員的專業實驗室^28-30。

參考文獻

1.E.Katz et al,Integrated nanoparticle-biomolecule hybrid systems：synthesis,properties,and applications,Angew.Chem.Int.Ed.2004,43,6042-6108.