[發明專利]用于檢測白色念珠菌的多孔材料、使用它的診斷方法及其制備方法

在審

• 申請號: 201880066727.6
• 申請日: 2018-08-23
• 公開（公告）號: CN111212922A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: A·里貝斯·蒙帕雷;E·阿斯納爾·希梅諾;R·馬丁內斯·馬內斯;F·桑塞農·加拉爾薩;M·D·馬爾克斯·馬丁內斯;M·A·托莫·馬斯;J·裴曼·加西亞;L·F·馬薩爾·加維;E·希弗雷·佩雷斯
• 申請（專利權）人: 瓦侖西亞理工大學;M.P.網絡生物醫學研究中心財團;瓦倫西亞大區信仰理工大學及附屬醫院下屬信仰基金會健康研究院;羅維拉-威爾吉利大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6816;C12Q1/04
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 譚友丹

1.一種用于檢測白色念珠菌的多孔材料，包括位于內部孔隙中的指示物種和錨定在其外表面上與所述白色念珠菌基因組的片段互補的至少一個DNA序列，其中所述互補DNA序列阻擋從載體的內部孔隙釋放所述指示物種。

2.如權利要求1所述的多孔材料，其中所述互補DNA序列通過中性有機基團和結合寡核苷酸鍵合到所述載體的外表面。

3.如權利要求2所述的多孔材料，其中所述中性有機基團選自羧酸(-COOH)、醇(-OH)、醛(-CHO)、烯烴、炔烴、胺(-NH₂或NR’RR”)、酰胺(-C(O)NR’RR”)、疊氮(-N3)、酮(-C＝O)、酯(-COOR’)、醚(R’-O-R”)、鹵素、亞胺(RR'C＝NR)、異氰酸酯(-NCO)、異硫氰酸酯(-N＝C＝S)、腈(-C≡N)、硝基(-NO2)或硫醇(-SH)。

4.如權利要求3所述的多孔材料，其中所述結合寡核苷酸是寡核苷酸O1(SEQ No.1)。

5.如權利要求4所述的多孔材料，其中寡核苷酸O1(SEQ No.1)與寡核苷酸O2(SEQNo.2)雜交。

6.如權利要求1所述的多孔材料，其中所述互補DNA序列通過陽離子基團鍵合到所述載體的外表面。

7.如權利要求6所述的多孔材料，其中所述陽離子有機基團選自胺、胍基(H-N＝(NHR)NH2)、鏻(PH4+)或季銨(NR4+)。

8.如權利要求7所述的多孔材料，其中所述互補DNA序列是寡核苷酸O3(SEQ No.3)。

9.如權利要求1至8中任一權利要求所述的多孔材料，其特征在于，它由比表面積在200-1400m²g^-1之間的介孔二氧化硅組成。

10.如權利要求1至8中任一權利要求所述的多孔材料，其特征在于，它由納米多孔氧化鋁制成的膜或板組成。

11.一種用于檢測白色念珠菌的體外診斷方法，包括：

a)在水溶液中使權利要求1的多孔材料與待分析的DNA樣本接觸，

b)培育步驟a)的混合物，以便產生雜交反應，

c)測量釋放到所述混合物的水相中的指示物種的量。

12.一種用于制備權利要求1的多孔材料的方法，其特征在于，包括以下步驟：

a)制備由多孔二氧化硅或納米多孔氧化鋁制成的載體，

b)在步驟a)中制備的基質的內部孔隙中引入指示物種，

c)通過將中性或陽離子有機基團鍵合到所述基質的表面而使在步驟b)中獲得的裝載基質功能化，

d)如有必要，用鍵合到所述中性有機基團的結合寡核苷酸衍生所述基質，

e)在步驟c)或d)中獲得的多孔無機載體上添加與白色念珠菌基因組的片段互補的DNA序列。

13.如權利要求12所述的用于制備多孔材料的方法，其特征在于，在步驟e)中獲得的載體上添加同與白色念珠菌的基因組的片段互補的DNA序列雜交的DNA序列。