[發明專利]NR4A1配體、藥物組合物以及相關使用方法

在審

• 申請號: 201880065793.1
• 申請日: 2018-08-09
• 公開（公告）號: CN111263635A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: S·瑟夫
• 申請（專利權）人: 德克薩斯農業及機械體系綜合大學
• 主分類號: A61K31/40
• 分類號: A61K31/40;A61K31/403;A61K31/404;C07D209/02;C07D209/04;C07D209/10
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅;李渤

描述了NR4A1配體、包含所述NR4A1配體的藥物組合物以及相關的使用方法。治療可通過調節NR4A1活性治療的個體的疾病或病癥的方法，其包括向所述個體給予治療有效量的本文所述的化合物或藥物組合物。

相關申請的交叉引用

本申請要求于2017年8月10日提交的第62/543761號美國申請的權益，其內容通過引用并入本文。

背景

核受體亞家族4的A組成員1(NR4A1)在結腸、胰腺、乳腺(雌激素受體陽性和陰性)和肺部腫瘤中過表達；在乳腺、結腸和肺部腫瘤患者中，NR4A1的高表達預示著生存率降低。NR4A1在癌癥中的功能活性已通過敲低或過表達在癌細胞系中進行了廣泛研究，且結果已表明在肺癌、黑色素瘤、淋巴瘤、胰腺癌、結腸癌、乳腺癌、腎癌、宮頸癌、卵巢癌和胃癌細胞系中，NR4A1調節癌細胞增殖、存活、細胞周期進程、遷移和侵襲中的一種或多種(圖1)。研究已將β1和其他整聯蛋白確定為NR4A1調節的基因。研究還表明NR4A1在橫紋肌肉瘤(RMS)患者的腫瘤中過表達，并且該受體調節RMS細胞中的促癌途徑，如圖1所示。NR4A1的促癌功能包括調節幾個本身是單一藥物靶點的基因，包括整聯蛋白、存活蛋白、EGFR和其他受體酪氨酸激酶。

這表明NR4A1拮抗劑的開發將代表獨特的化學療法，其同時靶向與實體瘤的生長、存活和遷移/侵襲相關的多種促癌途徑。研究最初表明幾種1,1-雙(3'-吲哚基)-1-(對位取代的苯基)甲烷(C-DIM)化合物使NR4Al失活，隨后的研究確定了作為NR4A1配體的DIM-C-pPhOH和其他對位取代的苯基類似物。DIM-C-pPhOH和相關化合物在細胞培養物中在10-20μM的濃度下阻斷圖1中概述的促癌途徑，并在30-40mg/kg/d的劑量下部分抑制腫瘤生長。DIM-C-pPhOH對NR4A1具有高結合親和力(Ko-0.100μM)，但顯示出短的體內半衰期。

如上所述，研究已經集中在結合NR4A1并充當拮抗劑(反向激動劑)的NR4A1配體的開發上。本發明的一名或多名發明人的研究已經依賴于RNA干擾(RNAi)以敲低NR4A1，以及依賴于分子/生化研究來確定受體敲低對細胞功能和細胞功能所需的相關途徑的影響。初步研究表明NR4A1的敲低導致胰腺癌細胞生長減緩和凋亡的誘導；在橫紋肌肉瘤、肺癌、乳腺癌、腎癌和結腸癌細胞系中也觀察到了這一點。機理研究表明NR4A1通過與結合到促存活(存活蛋白和bcl2)和生長促進(EGFR和其他受體酪氨酸激酶)基因的近端富含GC的區域的Sp轉錄因子相互作用，充當激活這些基因的輔因子。與其他輔因子(例如p300)偶聯的NR4A1激活并調節這些基因的表達。

已經證明在一系列C-DIM類似物中，對羥基苯基類似物(DIM-C-pPhOH；CDIM8)不僅結合于NR4A1，而且充當拮抗劑。因此，DIM-C-pPhOH抑制癌細胞的生長和存活，并抑制存活蛋白、EGFR和其他NR4A1/Sp調節的基因的表達。通過RNAi對NR4A1的敲低也通過sestrin的p53依賴性和非依賴性活化來抑制mTOR信號傳導；在多種癌細胞系中針對DIM-C-pPhOH和其他NR4A1/C-DIM拮抗劑觀察到相似的結果。NR4A1通過調節異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)和含硫氧還蛋白結構域蛋白5(TXNDC5)的表達，在維持癌細胞系中的低氧化應激方面也起關鍵作用。敲低NR4A1或用DIM-C-pPhOH和其他NR4A1拮抗劑處理降低IDH1和TXNDC6的表達，導致在許多癌細胞系中的活性氧(ROS)的誘導、ROS依賴性內質網應激以及細胞死亡(圖1)。最近的研究表明NR4A1在癌細胞遷移/侵襲中起關鍵作用，這是由于NR4A1/Sp介導的β1-整聯蛋白(一種促侵襲基因)的調節。敲低NR4A1或用DIM-C-pPhOH或其他NR4A1拮抗劑處理減少癌細胞遷移并下調β1-整聯蛋白和其他整聯蛋白(圖1)。